初级的(primary)和二次细胞培养(secondary cell culture)的区别

在讨论初级和次级细胞培养的区别之前，让我们先简单地定义什么是细胞培养。细胞培养是从动物或植物中取出细胞，然后在人工控制的环境中生长的过程。细胞可以直接从组织中取出，用酶或机械方法分解，也可以从已经建立的培养基中获得。原代和二级细胞培养的关键区别在于，用于原代细胞培养的细胞是直接从动物或植物组织中获得的，而用于二级细胞培养的细胞则是从已经建立的原代培养物中获得的。因此，二次文化是在原始文化基础上发展起来的一种新文化。

为了更好地分化它们，让我们更深入地了解原代和次级细胞培养的意义。

什么是原代细胞培养(primary cell culture)？

原代细胞培养是指通过酶或机械措施使细胞与亲本动物或植物组织分离，并在受控环境条件下，在玻璃或塑料容器中的合适基质中保持细胞生长。原代培养的细胞与原始组织中的细胞具有相同的核型（真核细胞细胞核中染色体的数目和外观）。原代细胞培养按培养所用细胞的种类可分为两类。

• 锚定依赖性或粘附性细胞-这些细胞需要附着物才能生长。粘附细胞通常来源于**的组织，例如来自肾脏的细胞不动，嵌入结缔组织中。

• 非锚定细胞或悬浮细胞-这些细胞生长不需要附着物。换句话说，这些细胞不附着在培养血管的表面。所有悬浮培养物都来自血液系统的细胞；例如，白细胞淋巴细胞悬浮在血浆中。

原代培养的细胞寿命有限。由于多种原因，细胞不能无限期地保持。原代培养中细胞数量的增加会导致底物和营养物质的枯竭。此外，细胞活性会逐渐增加培养物中毒性代谢物的水平，从而抑制细胞的进一步生长。

At this stage, a secondary or a subculture has to be performed to ensure continuous cell growth.

什么是二次细胞培养(secondary cell culture)？

如上所述，当贴壁培养中的细胞占据所有可用的底物或当悬浮培养中的细胞超过培养基支持进一步生长的能力时，细胞增殖开始减少或完全停止。为了保持最佳的细胞密度以继续生长和**进一步的增殖，必须对原代培养进行继代培养。这个过程被称为二次细胞培养。

在第二次细胞培养过程中，原代培养的细胞被转移到一个新的血管中。这个过程包括去除先前的生长培养基和分离粘附的原代培养细胞。细胞二次培养是周期性地为细胞提供生长空间和新鲜的营养物质，从而延长细胞的寿命，使培养的细胞数量增加。

二次培养将一定体积的原代培养物放入等量的新鲜生长培养基中，可以长期维持细胞系。例如在工业过程或科学实验中，二次培养到更大体积的新鲜生长介质中以增加细胞数量。

原代细胞培养(primary cell culture)和二次细胞培养(secondary cell culture)的区别

由于我们现在已经分别理解了这两个术语，我们将比较这两个术语，以便找出它们之间的其他差异。

何时使用原代和/或二级细胞培养

这取决于你想学什么和你做什么样的实验。

原代细胞培养：这是一个从父母组织中培养细胞的过程。原代培养的细胞由于基质和营养物质的耗尽和毒素的积累，其寿命将是有限的。尽管在分离过程中使用了分离技术，原代培养可能包含几种类型的细胞。然而，在所有类型的实验中，这可能不是一个问题，在这种情况下，可以单独使用原代培养。

二次细胞培养：通常实验中，原代培养获得的细胞数量不足。二次细胞培养为扩大细胞数量和延长寿命提供了机会。它可以使用选择性培养基进一步选择细胞，并允许群体中基因型和表型的一致性。此过程用于产生复制培养基，用于基本特性鉴定、保存和实验。

与亲本组织相似

原代细胞培养：用于原代细胞培养的细胞直接从动物或植物组织中获得。因此，与亲代细胞在体内培养时的反应更接近于原代培养。

二次细胞培养：二次细胞培养源于原代细胞培养。虽然亚培养可以延长细胞的寿命，但在几个阶段之后，细胞可能会发生转化，或者可能会失去对分裂不超过一定次数的控制。这可能是因为原代细胞在亚培养过程中发生突变或基因改变。例如，一些微生物倾向于通过改变其生物学特性来适应与自然环境大不相同的培养条件。

培养过程-获得细胞

原代细胞培养：在原代细胞培养中，动物或植物组织将经历冲洗、分离、机械或酶分解等阶段。分解的组织将包含各种不同类型的细胞，这可能需要采用分离技术来分离感兴趣的细胞。

二次细胞培养：在二次细胞培养中，如果原代培养是贴壁培养，第一步是通过机械或酶的方法将细胞从附着物（培养管表面）分离出来。然后，这些细胞必须彼此分离，形成一个单细胞悬浮液。

培养细胞数

原代细胞培养：不希望有一个绝对的单细胞悬浮液，因为许多原代细胞在小集群中生存得更好。

二次细胞培养：产生单细胞悬浮液就足够了。

文化寿命

原代细胞培养：原代细胞培养的寿命是有限的。如上所述，这是因为细胞的生长耗尽了底物和营养物质，导致有毒代谢物的积累。结果，细胞生长速度逐渐下降，导致细胞死亡。

二次细胞培养：二次细胞培养延长细胞寿命。周期性亚培养可通过原代细胞的转化或遗传改变产生永生细胞。

污染风险

原代细胞培养更难进行原代培养。一般来说，原代细胞培养需要富含氨基酸、微量营养素、某些激素和生长因子的混合物。因此，在原代细胞培养物中污染的风险比二级细胞培养物高。

二次细胞培养：二次细胞培养相对容易维持，污染风险低于原代细胞培养。

在这篇文章中，我们试图理解原代细胞培养和次级细胞培养这两个术语，然后进行比较，以突出它们之间的主要区别。基本的区别在于细胞是如何从培养中获得的；用于原代细胞培养的细胞是直接从动物或植物组织中获得的，而用于二次细胞培养的细胞则是从已经建立的原代培养物中获得的。