Klenow片段与DNA聚合酶1的关键区别在于,Klenow片段是DNA聚合酶1的大部分,缺乏5′至3′核酸外切酶活性,而DNA聚合酶是大肠杆菌的一种酶,具有5′至3′核酸外切酶活性。
DNA聚合酶是生物体DNA复制的关键酶之一。根据大小和形状,在真核生物和原核生物中发现了不同形式的DNA聚合酶酶。DNA聚合酶1、2和3只存在于原核生物中,它们在DNA复制中起着不同的作用。DNA聚合酶1有3个结构域,分别为5′至3′聚合酶、3′至5′核酸外切酶活性和5′至3′核酸外切酶活性。Klenow片段是DNA聚合酶1的蛋白水解产物。它具有完整DNA聚合酶1的5~3′聚合酶和3′至5′核酸外切酶活性,但缺乏5′至3′核酸外切酶活性。
目录
1. 概述和关键区别
2. 什么是克莱诺碎片
3. 什么是DNA聚合酶1
4. klenw片段与DNA聚合酶1的相似性
5. 并排比较-Klenow片段与DNA聚合酶1以表格形式
6. 摘要
什么是克莱诺碎片(klenow fragment)?
Klenow片段是DNA聚合酶1的很大一部分。与DNA聚合酶1不同,Klenow片段缺乏5′至3′核酸前向核酸酶域,因此没有5′至3′核酸外切酶活性。Klenow片段是用一种叫做枯草杆菌素的蛋白酶消化DNA聚合酶1产生的,枯草杆菌素是一种蛋白质消化酶。在某些应用中,Klenow片段的3′至5′核酸外切酶活性变得不理想。它可以通过在编码Klenow片段的基因中引入突变来消除。产生的酶只有5′到3′聚合酶活性,称为外显Klenow片段。从形态学上看,Klenow片段与人类右手相似。它有N端3′-5′核酸外切酶结构域和C端多聚酶结构域。
Klenow片段是分子生物学技术中的重要工具。Klenow碎片有多种用途。它们在钝端克隆中极为重要,以便产生钝片段。Klenow碎片可以移除3'悬挑或填充5'悬挑形成钝端。此外,Klenow片段被用来从单链合成双链DNA。此外,他们还被用来制备放射性标记探针使用5'到3'的DNA依赖性DNA聚合酶活性。
什么是dna聚合酶1(dna polymerase 1)?
DNA聚合酶1(pol1)是在原核生物中发现的一种细菌DNA复制所必需的酶。这是阿瑟·科恩伯格1956年发现的第一种DNA聚合酶。pol1是大肠杆菌中含量最高的聚合酶。它由polA基因编码,由928个氨基酸组成。它由三个领域组成。这三个领域都具有不同的功能。两个结构域执行5′至3′核酸外切酶活性和3′至5′核酸外切酶活性。由于Pol-1具有这种活性,它作为一种DNA修复酶而不是DNA复制酶而广受欢迎。第三个结构域具有催化多重聚合(5′到3′)的能力,然后释放模板DNA,通过填充新的DNA和去除RNA引物将冈崎片段连接在一起。
从大肠杆菌中分离得到的Pol-1在分子方面有着广泛的应用。然而,一旦Taq聚合酶被发现,它就取代了PCR技术中的大肠杆菌pol1。Taq聚合酶是一种耐热DNA聚合酶,属于Pol-1。
克莱诺碎片(klenow fragment)和dna聚合酶1(dna polymerase 1)的共同点
- Klenow片段是DNA聚合酶1的重要组成部分。
- 它们具有5′到3′DNA依赖的DNA聚合酶活性和3′到5′核酸外切酶活性,介导校对。
- 它们有多种用途。
克莱诺碎片(klenow fragment)和dna聚合酶1(dna polymerase 1)的区别
Klenow片段与DNA聚合酶1的主要区别在于Klenow片段缺乏5′至3′核酸外切酶活性,而DNA聚合酶1具有5′至3′核酸外切酶活性。因此,现在Kle1有三个结构域。
下面的信息图显示了Klenow片段和DNA聚合酶1之间差异的更多细节。
总结 - 克莱诺碎片(klenow fragment) vs. dna聚合酶1(dna polymerase 1)
DNA聚合酶1是大肠杆菌的一种酶,具有5′至3′聚合区、3′至5′核酸外切酶区和5′至3′核酸外切酶区三个结构域。Klenow片段是DNA聚合酶的重要组成部分。它缺少一个DNA聚合酶1区,即5′至3′核酸外切酶区。Klenow片段与DNA聚合酶1的关键区别在于Klenow片段没有5′至3′核酸外切酶域,而DNA聚合酶1具有5′至3′核酸外切酶域。
引用
1“DNA聚合酶I-概述|科学直接主题”。Sciencedirect.Com2020年,
2“克莱诺碎片”。英语维基百科.Org2020年,