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エリサとウェスタンブロットの大きな違いは、エリサ(酵素免疫測定法)がウイルスなどの感染症にかかったかどうかを検出する診断ツールであるのに対し、ウェスタンブロットはタンパク質試料から特定のタンパク質を検出する技術である点です。
エイズは世界的な問題となっており、この致命的な病気の発生率はここ数十年で驚くほど増加しています。 HIV検査は、この症候群の原因となるヒト免疫不全ウイルス(HIV)の存在を検出するものです。HIV検査の中でも、ELISA法とウェスタンブロット法は、現在とても人気があります。ELISAはプレートベースのアッセイ技術である。HIVに対する抗体を検出するための酵素免疫測定法です。ウエスタンブロットは、標識抗体を用いてタンパク質混合物から特定のタンパク質を検出します。
1 概要と主な相違点 2. エリサとは 3. ウェスタンブロットとは 4. エリサとウェスタンブロットとの類似点 5.表形式でのサイドバイサイドの比較 - Elisa と Western Blot 6. まとめ
酵素免疫測定法(ELISA)は、主にHIVの検出に使用される最初の検査法である。プレートベースのアッセイです。HIV抗体の検出に使用され、この検査は高い感度を示しました。この技術では、試料中の抗原を固体表面に固定化された抗体に結合させる。抗原が固定化されると、酵素結合抗体と複合体を形成する。これらの結合した酵素は、次にそれぞれの基質とインキュベートされる。
図01:ELISA
酵素-基質反応により、測定可能な色の生成物が生成されます。生成物の量を測定することで、試料中に存在する抗原の量を定量することができます。そのため、ELISAは非常に特殊で複雑な技術であり、熟練した技術者の注意が必要です。また、高度な機器を必要とするため、時間がかかる作業でもあります。
プロテインブロッティングは、タンパク質混合物から特定のタンパク質を検出することができる技術です。プロテインブロットは、SDS-ポリアクリルアミドゲル中のタンパク質の鏡像を得るために使用される膜である。ウェスタンブロッティングに使用される膜は、主にニトロセルロースやポリビニリデン・ジフルオリド(PVDF)で構成されています。転移タンパク質を含む膜は、特定のタンパク質を同定するために使用することができます。ハイブリダイゼーションにより目的のタンパク質を検出するためには、高品質の抗体が必要です。抗体はその特異的な**抗原に結合し、目的の抗原(タンパク質)の存在を示す。
図02:イムノブロット
SDSポリアクリルアミドゲルからウェスタンブロットへのタンパク質の転写は、エレクトロブロッティングによって行われる。ゲルからタンパク質を電気泳動し、ニトロセルロース膜に転写する方法(ウェスタンブロット)を、高速かつ効率的に行うことができます。
ウエスタンブロットは、ヒト血清サンプル中の抗HIV抗体の検出に使用できます。また、ウエスタンブロットは、B型肝炎感染の確認検査や狂牛病の最終検査としても使用することができます。
ELISAは、患者の血液中の抗原や抗体の存在を検出するための非常に感度の高い、非常に高度な方法であり、一方、ウェスタンブロットは、タンパク質混合物から特定のタンパク質を検出する技術である。これがElisaとwesternblotの大きな違いです。ELISAは定性的かつ定量的なものである。これに対し、ウェスタンブロットは定性的なものである。半定量的なこともあります。Elisaテストは、検査に要する時間を考えると、westernblotよりも時間がかかる。
以下のインフォグラフィックは、ElisaとWestern Blotの違いをまとめたものです。
ELISAは、血液中の抗原や抗体の存在を検出する、非常に感度の高い高度な方法です。一方、ウェスタンブロッティングは、タンパク質の混合物から特定のタンパク質を同定するために開発された。これがエリサとウェスタンブロットの大きな違いです。エリサはHIVを検出するために作られた最初の検査法です。ELISAの結果を確認するために、westernblotを用いることができる。ELISAもwesternblotもHIVを検出する間接的な方法であると考えられている。
1 Kingman, Tricia."ELISA:目的、手順、結果"Healthline, Healthline Media, September 17, 2018, available here."Western Blot", Scitable, Nature Publishing Group, available here.2 "Western Blot".