密度分割遠心分離と等密度遠心分離の大きな違いは、密度分割遠心分離は大きさが異なるが密度が異なる粒子を分離する場合に重要であり、等密度遠心分離は密度が異なるが大きさが異なる粒子を分離する場合に重要である点です。

遠心分離は、溶液中の粒子を媒体の大きさ、形状、密度、粘性などに応じて分離する分析手法です。ここでは、浮遊粒子を含む溶液を遠沈管に入れ、遠沈管**をローターにセットして決められた速度で回転させ、溶液から粒子を分離する必要があります。

カタログ

1. 概要と主な違い 2. 帯状遠心とは 3. 密度遠心とは 4. 横並び比較 - 表形式での帯状遠心と等密度遠心 5. まとめ

レートゾーナル遠心分離は何ですか？

速度分割遠心法は、溶液中の粒子を密度ではなく大きさで分離することができる分析手法である。つまり、粒子を大きさによって溶液から分離する技術であり、粒子の密度の違いは考慮されていない。そのため、エンドソームなどの小器官の分離に非常に有効な技術である。さらに、タンパク質の分離にも利用できる。

図01：卓上型遠心分離機

また、この遠心分離は時間依存性があります。つまり、サンプルの位置は沈殿の時間と関係があるのです。この方法で得られる勾配は平坦で、この勾配の最大密度がペレットの中で最も密度の高い粒子の密度を超えることはない。

アイソピクニック遠心分離法は何ですか？

等密度遠心分離は、溶液の粒子を大きさではなく、密度に基づいて分離することができる分析技術です。つまり、溶液中の粒子の密度が違えば、分離することができるのです。もし、大きさは違っても密度が違う場合は、この分離技術には適していません。粒子の大きさは、粒子の移動速度にのみ影響する。したがって、この手法は時間に依存しない。

図02：遠心分離で測定した密度勾配

さらに重要なことは、この技術を使って核酸をグラデーションで分離することができることです。等密度遠心分離で得られる勾配は非常に急である。また、粒子の浮遊密度を利用して分離するため、パーティクルを発生させない。

レートゾーナルとアイソピクニック遠心分離法の違い

密度分割遠心分離と等密度遠心分離の大きな違いは、密度分割遠心分離は大きさが異なるが密度が異なる粒子を分離する場合に重要であり、等密度遠心分離は密度が異なるが大きさが異なる粒子を分離する場合に重要である点です。

また、等密度遠心分離と大きく異なる点として、等密度遠心分離は時間に依存するのに対し、レートゾーン遠心分離は時間に依存しないことが挙げられます。また、rate zoned centrifugationで与えられる勾配は平坦であるが、isodensity centrifugationでは急勾配である。

概要 - レートゾーナル vs. アイソピクニック遠心分離法

遠心分離は重要な分析技術である。生物学的用途では、レートゾーン遠心分離と等密度遠心分離の2種類の遠心分離を使用しています。密度分割遠心法と等密度遠心法の大きな違いは、密度分割遠心法は粒径が異なるが密度が異なる粒子を分離する場合に重要であり、等密度遠心法は密度が異なるが粒径が異なる粒子を分離する場合に重要である点です。

引用

1 デ・ヴィディ、ガウラヴ"Family ****", LinkedIn SlideShare, 20 May 2012, available here.