きめこまかと間接エリサの違い
きめこまかと間接エリサの違い
酵素免疫測定法として知られる酵素結合免疫測定法（ELISA）は、血液中の抗体を検出する血清学的検査法です。特定の種類のウイルスやその他の感染性物質（抗原）にさらされ、その感染に対する抗体が体内で作られたかどうかを調べるための診断ツールとして使用されます。ELISAは、過去および現在の感染症も特定することができます。このため、ELISA法は、病気の詳細な分析を行う前のスクリーニング検査として医師によく利用されています。この検査は、患者さんから血液サンプルを採取し、実験室で行うことができます。直接法と間接法の主な違いは、間接法は感度が高く、二次抗体の添加が必要なのに対し、直接法は感度が低く、一次抗体のみを使用することである。
目次 1. 概要と主な違い 2. 直接法 ELISA とは 3. 間接法 ELISA とは 4. 並べて比較 - 直接法 vs. 間接法 ELISA 5. まとめ
ダイレクトエリサ法（直接エリサ法）は何ですか？
ELISAは、血液中の特定の抗原や抗体の存在を確認するために使用される疾患診断検査です。プレートテストである。検出しやすい酵素と結合した抗体を使用します。血清試料中の抗原の存在と、酵素標識した特異的**抗体とを結合させる。最後に、特定の基質を加えて酵素と反応させる。この酵素は、基質を着色したり、シグナルを出す生成物に変換する。化学基質の色の変化は、血清試料中の特異的な抗体の存在を示しています。ダイレクトELISAは、酵素と結合した一次抗体のみを使用します。抗原と結合すると、急速に色が変化し、血液中に感染症**の病原体があることを示す。しかし、ダイレクトELISAでは、抗原エピトープが抗原結合に限定されるため、シグナル強度は弱くなります。そのため、直接法 ELISA は間接法 ELISA よりも感度が低くなっています。
図01：ダイレクトELISA
間接エリサは何ですか？
ELISAは、一次抗体と二次抗体の2種類の抗体を用いて行うことができます。間接的なELISAツールは、より良い検出のためにシグナルを増幅するために両方の抗体を使用します。以下に、間接法 ELISA の手法を説明する。
- プレートは抗原とインキュベートされた後、非特異的**結合をブロックするために洗浄されます。
- その後、一次抗体を添加し、洗浄する。
- 酵素結合二次抗体を添加し、洗浄します。
- 酵素と反応する基質を添加すること。
- 試料中に抗原の存在が検出されるか、あるいは特異的であるかのいずれかである**。
間接免疫測定法では、1つの一次抗体に複数の二次抗体を結合させることができます。二次抗体は、容易に検出可能な酵素と関連しています。このように、1つの結合で強い信号が出るのは、複数の結合が相互に作用しているからです。その結果、間接的なELISAは直接的なELISAよりも感度が高くなります。しかし、間接法ELISAは、二次抗体の交差反応により非特異的である****。
図02：間接法ELISA試験
きめこまかと間接エリサの違い
| 直接法 ELISA と間接法 ELISA の比較 | |
| 直接法 ELISA は間接法 ELISA に比べ感度が低い。 | 間接的なELISAはより高感度です。 |
| 使用時間 | |
| 直接免疫測定法（ELISA法）は、迅速な測定が可能な検査法です。 | 間接法 ELISA は時間がかかる方法です。 |
| 抗体の使用 | |
| 直接法では、1つの抗体（一次抗体）のみを使用します。 | 間接法ELISAでは、一次抗体と二次抗体が使用されます。 |
| 酵素関連 | |
| 一次抗体は、酵素と結びついている。 | 二次抗体は、酵素と結びついている。 |
| 二次抗体の交差反応性 | |
| Direct ELISAは、二次抗体の交差反応性を排除しています。 | Indirect ELISAは、二次抗体の交差反応性の影響を受けます。 |
| 信号 | |
| 間接法ELISAに比べ、シグナルは弱い。 | 間接法では、シグナルが増幅されるため、容易に検出することができます。 |
概要 - きめこまか vs. 間接エリサ
ELISAは、主に患者の血液サンプル中の抗体または抗原の存在を免疫学的に検出するために使用される生化学的手法である。直接法、間接法と呼ばれる2つの方法で行うことができます。直接法（Direct ELISA）では一次抗体のみを用いて抗原を検出しますが、間接法（Indirect ELISA）では一次抗体と二次抗体の両方を用いて抗原を検出します。直接法では一次抗体が標識され、間接法では二次抗体が標識されます。これが、直接法と間接法の違いです。
参考文献1 "Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)", Bulletin of World Health Organization. u, US National Library of Medicine, 1976.Web. 29 March 2017. loon, A.M van, J.T van Der Logt, F.W. Heessen and J. van Der Veen. "Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of immunoglobulin M and A antibodies in toxoplasmosis using labeled antigens: comparison with indirect immunofluorescence and double sandwich enzyme-linked immunosorbent assay" （「標識抗原を用いた酵素結合免疫測定法によるトキソプラズマ症のM抗体およびA抗体検出法」）...方法」、Journal of Clinical Microbiology. u, US National Library of Medicine, June 1983.ウェブ 2017年3月29日
画像提供:1. "ELISA diagram" By Cavitri - Own work (CC BY 3.0) via Comm*** Wikimedia 2."Indirect ELISA" By Cawang - 自作 (CC0) via Comm*** Wikimedia
- 2020-10-25 22:46 に公開
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- 分類：科学
