直接的(direct)和間接elisa(indirect elisa)的區別
酶聯免疫分析(ELISA)也稱為酶免疫分析,是一種檢測血液中抗體的血清學檢測方法。它被用作一種診斷工具,用來查明病人是否接觸過某種特定類型的病毒或另一種傳染源(抗原),以及身體是否產生了抗感染的抗體。酶聯免疫吸附法還可以鑑別過去和現在的感染情況。因此,在深入分析疾病之前,ELISA常被醫生用作預篩選試驗。這個測試可以在實驗室裡通過從病人身上採集血樣來進行。酶聯免疫吸附試驗有兩種:直接ELISA和間接ELISA。直接ELISA和間接ELISA的關鍵區別在於,間接ELISA更敏感,需要添加一個二級抗體,而直接ELISA則不那麼敏感,只使用一個一級抗體。
內容1。概述和主要區別2。什麼是直接ELISA3。什麼是間接ELISA。並列比較——直接與間接ELISA 5。摘要
什麼是直接elisa法(direct elisa)?
ELISA是一種疾病診斷試驗,用於確定血液中是否存在特定抗原或抗體。這是一種平板試驗。它使用抗體與容易檢測的酶相連接。抗原在血清樣本中的存在與酶結合的特**抗體結合。在最後一步,加入一個特定的底物與酶反應。這種酶將底物轉化為一種有色或信號產生的產物。化學底物的顏色變化表明血清樣本中存在特定抗體。直接酶聯免疫吸附試驗僅使用與酶連接的一級抗體。一旦與抗原結合,它會迅速改變顏色,表明血液中存在感染**原體。然而,在直接ELISA中,由於抗原表位僅限於抗原結合,信號強度較弱。因此,與間接ELISA相比,直接ELISA的敏感性較低。
什麼是間接elisa(indirect elisa)?
ELISA可以用兩種抗體進行,即一級抗體和二級抗體。間接ELISA工具使用這兩種抗體來放大信號,以便更好地檢測。間接ELISA技術如下。
- 培養板與抗原一起孵育,然後清洗以阻止非特**結合。
- 然後加入初級抗體並洗滌。
- 加入酶聯二級抗體並洗滌。
- 添加一種底物,使其與酶發生反應。
- 或是在樣本中檢測到抗原的存在,或是特**的。
在間接ELISA試驗中,多個次級抗體可與單一的一級抗體結合。次級抗體與容易檢測的酶有關。因此,一個結合可以產生一個強大的信號,因為不止一個相互作用。因此,間接ELISA比直接ELISA更敏感。然而,間接ELISA法由於二次抗體的交叉反應而產生非特****。
直接的(direct)和間接elisa(indirect elisa)的區別
直接ELISA法與間接ELISA法 | |
與間接ELISA相比,直接ELISA的敏感性較低。 | 間接ELISA法更敏感。 |
花費的時間 | |
直接ELISA檢測是一個快速的過程。 | 間接ELISA法耗時較長。 |
抗體的使用 | |
直接ELISA只使用一種抗體(原抗體)。 | 一級和二級抗體用於間接ELISA。 |
與酶有關 | |
初級抗體與酶有關。 | 次級抗體與酶有關。 |
第二抗體的交叉反應性 | |
直接ELISA消除了第二抗體的交叉反應性。 | 間接ELISA受第二抗體交叉反應的影響。 |
信號 | |
與間接ELISA相比,信號較弱。 | 間接ELISA法擴增信號。因此,很容易檢測到。 |
總結 - 直接的(direct) vs. 間接elisa(indirect elisa)
酶聯免疫吸附試驗是一種生化技術,主要用於免疫學檢測病人血液樣本中是否存在抗體或抗原。它可以通過兩種被稱為直接或間接ELISA的過程來進行。直接ELISA試驗只使用一級抗體來檢測抗原,而間接ELISA則同時使用一級和二級抗體。在直接ELISA中,主要抗體被標記,而在間接ELISA中,次要抗體被標記。這就是直接ELISA和間接ELISA的區別。
參考文獻1.“酶聯免疫吸附試驗(ELISA)”,《世界衛生組織公報》。U、 美國國家醫學圖書館,1976年。網狀物。2017年3月29日。Loon,A.M van,J.T van Der Logt,F.W.Heessen和J.van Der Veen。“使用標記抗原檢測弓形蟲病中免疫球蛋白M和A抗體的酶聯免疫吸附試驗:與間接免疫熒光法和雙夾心酶聯免疫吸附法的比較”,《臨床微生物學雜誌》。U、 美國國家醫學圖書館,1983年6月。網狀物。2017年3月29日
Image Courtesy:
1. “ELISA diagram” By Cavitri – Own work (CC BY 3.0) via Comm*** Wikimedia
2. “Indirect ELISA” By Cawang – Own work (CC0) via Comm*** Wikimedia