迟钝的(blunt)和粘端结扎术(sticky end ligation)的区别
限制性内切酶是切割双链DNA(dsDNA)的特**酶。它们在分子生物学中也被称为分子剪刀。限制性内切酶能够识别dsDNA的特定短序列,即识别位点,并能裂解磷酸二酯和氢键以打开双链。不同类型的酶会产生不同类型的钝端和片段。在生物学中,连接两条相邻的DNA链的连接酶。这一步称为结扎,根据DNA末端结扎的类型,可分为钝端结扎和粘端结扎。钝端连接和粘端连接的关键区别在于,钝端连接发生在包含两个钝端的DN**段之间,而粘端连接发生在5'和3'悬垂之间。与钝端结扎相比,粘端结扎更有效、更稳定。
内容1。概述和主要区别2。什么是钝端结扎3。什么是粘端结扎4。并排比较-钝端结扎与粘端结扎5。摘要
什么是钝端结扎(a blunt end ligation)?
一些限制性内切酶可以在相反的碱基上切割DNA,产生钝端DN**段。这些酶被称为钝端切割器;它们直接切割到限制位点的中间,而不会留下单链的悬垂碱基。钝端也被称为非悬垂端,因为它们在端部没有3'和5'的悬垂底座。两条线的末端都是钝端的碱基对。常见的钝端切割酶有EcoRV-HaeIII、AluI和SmaI。
钝端结扎是指两个钝端之间的结扎。它不是一个突出的碱基的结扎。这种结扎比粘端结扎效率低。然而,在某些情况下,钝端连接比粘端连接更有利,尤其是当连接PCR产物时。PCR产物的生产总是有钝头。钝端结扎不需要DNA中互补的末端进行结扎。
什么是粘端结扎术(a sticky end ligation)?
一些限制性内切酶能够切割dsDNA,在末端留下一段悬垂的单链DNA。这些末端被称为粘性端或悬垂端。由于末端有不粘的碱基,需要两个碱基之间形成互补的碱基,因此需要在两个碱基之间形成具有粘性的碱基。因此,有必要对两个来源的DNA使用相同的限制性酶来产生匹配的连接片段。
粘端连接更有效,通常在克隆过程中非常理想。有几种限制性酶产生粘性末端。它们是EcoRI,BamHI,HindIII等。
迟钝的(blunt)和粘端结扎术(sticky end ligation)的区别
钝端结扎术vs粘端结扎术 | |
钝端连接发生在两个钝端DN**段之间。 | 粘端连接发生在两个匹配的带有粘性末端的DN**段之间。 |
酶 | |
钝头刀具产生钝头。 | 粘性端切刀产生粘性或粘性端部。 |
端部匹配要求 | |
它不需要匹配的片段或互补的碱基。 | 它需要在末端互补碱基来形成碱基对。 |
效率 | |
它的效率不如粘端结扎 | 它比钝端结扎更有效。 |
总结 - 迟钝的(blunt) vs. 粘端结扎术(sticky end ligation)
限制性内切酶能够切割dsDNA并产生不同末端的DN**段。它们识别特定的序列并限制DNA产生粘性和钝端。粘性的末端在碎片的末端有不成对的碱基。钝端是由于直裂而产生的,它们的末端有碱基对。粘端结扎需要两个互补的单链DN**段。钝端结扎发生在任何两个钝端碎片之间。这就是钝性结扎和粘性结扎的区别。
R参考文献:1。限制性酶如何成为分子生物学的工作马〉,《国家科学院院刊》。国家Acad科学,n.d.Web。2017年4月12日。阿德南,阿姆纳。限制性酶在生物技术中的应用。N、 p.,N.d.网络。2017年4月12日