什么是分光光度计的吸光度?(spectrophotometer absorbance?)

分光光度计的吸光度指的是溶液吸收的光量,由称为吸光度分光光度计的实验室仪器测量。在化学和生物学中,分光光度计被用于各种用途。它们可以帮助识别化合物,确定溶液的浓度,或估计悬浮在液体中的细胞数量。分光光度计的工作原理是将一组经过过滤的特定波长的光穿过样品溶液,并照射到一个光度计上。样品透射或吸收的光量,以及吸收的波长,揭示了样品的一些特性。...
Electromagnetic radiation includes a range of wavelengths over a small portion of the electromagnetic spectrum.

分光光度计的吸光度指的是溶液吸收的光量,由称为吸光度分光光度计的实验室仪器测量。在化学和生物学中,分光光度计被用于各种用途。它们可以帮助识别化合物,确定溶液的浓度,或估计悬浮在液体中的细胞数量。分光光度计的工作原理是将一组经过过滤的特定波长的光穿过样品溶液,并照射到一个光度计上。样品透射或吸收的光量,以及吸收的波长,揭示了样品的一些特性。

人类在视觉上感受到的光是一种能量形式,即电磁辐射,包括电磁波谱中一小部分的波长范围。伽马射线、X射线和其他400纳米(nm)以下的短波长是人眼不可见的,波长超过700纳米的也不可见,如红外光或无线电波。人类感知的颜色范围从400纳米左右的较短的蓝色和紫色波通过彩虹到红色,后者更接近700纳米。分光光度计测量的是可见光范围,与光谱的紫外线和红外线部分有一些重叠。

当我们看到一种颜色时,例如一片绿叶,我们看到的是该物品所传输的光波长。就绿叶而言,植物细胞中一种叫做叶绿素的化合物正在吸收来自太阳白光的蓝色和红色波长,但没有强烈吸收绿色。相反,绿色和接近绿色的波长被传输,植物看起来是绿色的。

在任何给定的液体溶液中,一些波长的光将比其他波长的光吸收得更多。分光光度计将一束白光穿过被研究的样品溶液。分光光度计的吸光度是被研究的化合物吸收的光量。这种光在被称为吸收光谱的波长范围内以不同的数量被吸收。

吸收光谱可以帮助识别样品化合物。例如,一些植物色素吸收的波长与叶绿素不同,可以通过它们的吸收图来区分,吸收图是分光光度计吸光度与波长的关系。吸收量最高的波长会在图上显示为尖峰,使每个化合物的图有一个特征形状。

溶液的浓度也可以从分光光度计的吸光度推断出来。这是通过朗伯-比尔定律(也称为比尔定律)来实现的,该定律是通过另外两个因素将分光光度计的吸光度与浓度联系起来的方程式:消光系数和路径长度,或样品管的宽度。消光系数是一个化学因素,对每个化合物都是不同的,但它可以通过在分光光度计中测试已知浓度的样品来确定。然后可以用比尔定律来解决同一化合物的未知浓度。

  • 发表于 2022-02-10 14:50
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  • 分类:科学

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