密切關係(affinity)和離子交換色譜法(ion exchange chromatography)的區別

親和層析和離子交換色譜的關鍵區別在於，我們可以使用親和色譜分離混合物中帶電荷或不帶電的成分，而我們可以使用離子交換色譜分離混合物中的帶電成分。

色譜法是一種我們可以用來分離混合物中所需成分的技術。液相色譜有液相色譜法、氣相色譜法等不同類型，親和色譜法和離子交換色譜法是液相色譜法的兩大類。此外，在這些技術中，有兩個階段。也就是說，它們是固定相和流動相。這些技術的目的是根據組分在固定相表面上的結合，分離流動相中的組分。

什麼是親和層析(affinity chromatography)？

親和層析是一種生物化學技術，我們利用這些成分之間的相互作用來分離混合物中的成分。

我們在本案例中使用的交互包括：

Antigen-antibody interacti***
Enzyme-substrate interacti***
Receptor-ligand interacti***
Protein-nucleic acid interacti***

在這項技術中，我們利用分子的分子特性進行分離。在這裡，我們允許所需化合物通過氫鍵、離子相互作用、二硫鍵橋、疏水相互作用等與固定相相互作用。不與固定相作用的分子將首先洗脫。因此，我們可以把它從混合物中分離出來。所需化合物將保持在固定相上。因此，我們可以用洗脫溶劑將其分離，並使其洗脫分離。

密切關係(affinity)和離子交換色譜法(ion exchange chromatography)的區別

圖01：色譜柱

親和層析在使用緩衝溶液從混合物中純化和濃縮物質時非常有用。此外，它有助於減少混合物中不需要的物質。當考慮我們用於這個過程的儀器時，我們應該使用一個充滿固定相的柱。然後，我們應該加載包含我們要分離的生物分子的流動相。接下來，讓它們與固定相結合。此後，使用洗滌緩衝液，我們可以分離非靶生物分子，但目標分子必須對固定相有很高的親和力才能成功分離。

什麼是離子交換色譜法(ion exchange chromatography)？

離子色譜法是一種可以分析離子物質的液相色譜法。通常，我們用它來分析無機陰離子和陽離子（即氯化物和硝酸鹽陰離子以及鉀、鈉陽離子）。雖然不常見，但我們也能分析有機離子。此外，我們可以使用這種技術來純化蛋白質，因為蛋白質是在一定pH值下帶電的分子。在這裡，我們使用一個固體固定相，帶電粒子可以附著在上面。例如，我們可以用樹脂聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物作為固體載體。

圖02：離子交換色譜的相

為了進一步解釋這一點，固定相有固定離子，如硫酸鹽陰離子或季胺陽離子。如果我們要維持這個系統的中性，每一個都應該與一個反離子（帶相反電荷的離子）相聯繫。在這裡，如果反離子是陽離子，那麼我們將其命名為陽離子交換樹脂。但是，如果反離子是陰離子，那麼這個體系就是陰離子交換樹脂。

離子交換過程有五個主要階段；

Initial stage
Adsorption of target
Starting of elution
End of elution
Regeneration

密切關係(affinity)和離子交換色譜法(ion exchange chromatography)的區別

親和層析是一種生化技術，我們利用這些成分之間的相互作用來分離混合物中的組分，而離子色譜法是一種可以分析離子物質的液相色譜法。因此，親和層析和離子交換色譜的主要區別在於，離子交換色譜只能用於離子物質的分離，而親和層析則可以同時分離帶電粒子和不帶電粒子。當考慮其工作原理時，親和層析和離子交換色譜的區別在於，由於目標分子對固定相有很高的親和力，所以親和色譜才得以進行。然而，對於離子交換色譜，目標分子的電荷與固定相表面的電荷相反。

下面的信息圖顯示了親和層析和離子交換色譜的區別，作為並列比較。

密切關係(affinity)和離子交換色譜法(ion exchange chromatography)的區別