反相高效液相色譜(rp hplc)和hic公司(hic)的區別

RP-HPLC和HIC的主要區別在於RP-HPLC使用了極性更強的流動相和極性較小的固定相。然而，HIC使用疏水性固定相，使得疏水性分子能夠附著在HIC上。

色譜法是一種分析技術，有助於將混合物分離成其組分。首先，我們必須把要分離的樣品溶解成溶液。這種溶液-物質混合物稱為流動相。然後流動相通過另一種叫做固定相的物質。固定相決定了組分的分離。分離是由於物質在流動相和固定相之間的分配而發生的。

什麼是反相高效液相色譜(rp hplc)？

術語RP-HPLC代表反相高效液相色譜法。它包括根據疏水性分離混合物中的組分。流動相中的疏水組分與固定相上的固定化疏水配體相連，而親水性組分則通過固定相洗脫而不吸附在固定相表面。

圖01:HPLC裝置

與其他色譜技術相比，該方法具有更高的重現性，具有廣泛的適用性。因此，我們在實驗室中使用該方法的高效液相色譜法超過75%。大多數情況下，我們使用水和可混溶的極性有機溶劑的水混合物作為流動相。因此，它將確保溶液中的疏水成分附著在固定相的表面上。

什麼是hic公司(hic)？

HIC是疏水相互作用色譜的意思。它是一種反相高效液相色譜法，主要用於蛋白質等生物大分子的分離。在這種方法中，我們需要使用水介質來**生物分子的樣品。這是因為有機溶劑會引起蛋白質變性。此外，這項技術利用了大分子與稍微疏水的固定相表面之間的相互作用。此外，我們必須在樣品中使用高濃度的鹽，因為這會鼓勵蛋白質保留在包裝上；這個過程稱為鹽析。通過逐漸降低鹽濃度，可以使生物大分子根據其疏水性分別洗脫。

通常，這種方法使用與離子交換色譜相反的條件。在這項技術中，首先，我們需要通過一個緩衝溶液通過柱，以減少溶質在樣品中的溶劑化。它使蛋白質的疏水區暴露出來。然而，當分子更疏水時，需要較少的鹽來促進結合。在這裡，疏水性較弱的溶質先洗脫，根據鹽濃度的變化，疏水性較強的溶質最後洗脫。