基因克隆与载体

当遗传学家使用小块DNA克隆一个基因并创造一个转基因生物（GMO）时，该DNA被称为载体。...

当遗传学家使用小块DNA克隆一个基因并创造一个转基因生物（GMO）时，该DNA被称为载体。

载体与基因和克隆有什么关系

在分子克隆中，载体是一种DNA分子，用作将外源基因转移或插入另一个细胞的载体，在那里可以复制和/或表达。载体是基因克隆的基本工具之一，如果它们还编码某种标记基因编码生物指示剂分子，则最有用。生物指示剂分子可在生物评估中测量，以确保它们在宿主生物体中的插入和表达。

具体地说，克隆载体是从病毒、质粒或（高等生物的）细胞中提取的DNA，为了克隆目的插入外源DNA片段。由于克隆载体可以稳定地维持在生物体中，因此该载体还包含允许方便地插入或移除DNA的特征。在被克隆到克隆载体中之后，DNA片段可以进一步亚克隆到另一个载体中，该载体可以以更高的特异性使用。

在某些情况下，病毒被用来感染细菌。这些病毒被称为噬菌体，简称噬菌体。逆转录病毒是将基因导入动物细胞的极好载体。质粒是环状DNA片段，是将外源DNA导入细菌细胞的最常用载体。它们通常携带抗生素抗性基因，可用于在抗生素培养皿上检测质粒DNA的表达。

基因转移到植物细胞中通常使用土壤杆菌根癌农杆菌，它作为载体，将大质粒插入宿主细胞。当有抗生素存在时，只有那些含有克隆载体的细胞才会生长。

六种主要的病媒是：

质粒。在细菌细胞内自动复制的环状染色质外DNA。质粒通常具有高拷贝数，如pUC19，每个细胞的拷贝数为500-700拷贝。
噬菌体：从噬菌体lambda衍生的线性DNA分子。它可以被外来DNA替换而不破坏其生命周期。
另一种结合质粒和噬菌体特征的环状染色体外DNA分子。
细菌人工染色体。基于细菌mini-F质粒。
酵母人工染色体。这是一种人工染色体，含有端粒（染色体末端的一次性缓冲液，在细胞分裂过程中被切断）和复制起源、酵母着丝粒（连接姐妹染色单体或二元体的染色体的一部分）以及酵母细胞中用于识别的可选标记。
人类人工染色体。这种类型的载体可能有助于基因导入人类细胞，并且是表达研究和确定人类染色体功能的工具。它可以携带非常大的DNA片段。

所有工程载体都有一个复制源（复制因子）、一个克隆位点（位于插入外源DNA不会破坏基本标记的复制或失活的位置）和一个可选择标记（通常是提供抗生素抗性的基因）

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