与人们最初的想法相反,生物素抗体不是一种针对生物素的物质。相反,生物素抗体是与生物素结合的抗体。生物素与配体-亲和素紧密结合,而亲和素又可以与荧光团等光探测分子结合。生物素和亲和素形成已知的最强的生物相关共价键之一,使生物素和亲和素共轭配体/受体单元在科学研究中特别有用。。
生物素是一种B族复合维生素——维生素B7。它是一种小分子,多个生物素分子可以与单个单克隆或多克隆抗体结合。生物素也是水溶性的,这一事实使得它在缓冲系统中比不溶性时具有更大的通用性。为了获得更高的特异性,通常建议将单克隆抗体与生物素结合,而不是多克隆抗体结合。生物素分子可以直接与感兴趣的抗体结合,也可以通过分子尾连接,以允许更自由的运动。。
生物素配体亲和素存在于鸡蛋白蛋白中。它制造成本低,易于隔离。多个抗生物素分子将与每个生物素受体结合,放大单个抗体检测信号。当生物素抗体粘附在感兴趣的抗原上时,实验者可以将复合物暴露于与荧光团结合的抗生物素,使复合物可检测。通过荧光成像,可以用光学显微镜检测生物素抗体和亲和素结合配体,并且可以原位研究感兴趣的抗原。。
尽管创建和使用生物素抗体和荧光标记的抗生物素分子是抗原检测的常见解决方案,但仍然存在使用生物素/抗生物素复合物的替代方案。将生物素与神经毒素等配体结合有利于检测受所述神经毒素影响的神经元受体的位置。还可以将生物素与诸如信使核糖核酸(mRNA)等核苷酸序列结合,以发现这些核苷酸序列在何处被翻译成蛋白质或检测细胞mRNA调节。。
可以购买生物素化多克隆或单克隆抗体,尽管生物素化抗体的生产在许多实验者的能力范围内。在线可以找到建议抗体生物素化方法的协议,尽管最容易遵循的协议直接将生物素与抗体联系起来,而不是建议如何插入分子间隔基。生物素及其相关抗体之间的分子间隔允许更大的间隔,使更多的分子暴露于结合位点,而这些生物素抗体通常是购买而不是制造的。。
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