關鍵區別-原位雜交與免疫組織化學
癌症和傳染病診斷是一個流行的趨勢,利用新的蛋白質組學和基因組學技術來識別腫瘤或感染性細胞、其增殖和細胞發育部位,並分析大多數傳染性和非傳染性疾病的遺傳基礎。這將導致精確的藥物加工和設計,並開發針對疾病的定製療法。原位雜交(ISH)和免疫組織化學(IHC)是腫瘤生物學中應用最廣泛的兩種技術,而原位雜交和免疫化學的關鍵區別在於分析過程中所使用的分子。在ISH中,核酸探針用於分析,而在IHC中,單克隆抗體和多克隆抗體用於診斷測定。
目錄
1. 概述和主要區別
2. 什麼是原位雜交
3. 什麼是免疫組織化學
4. 原位雜交與免疫組織化學的相似性
5. 並列比較-原位雜交與免疫組織化學的表格形式
6. 摘要
什麼是原位雜交(in situ hybridization (ish))?
原位雜交是一種直接在組織的一部分或部分、整個組織或細胞中進行的核酸雜交技術。該技術依賴於Watson-Crick互補鹼基配對理論,產生DNA-DNA雜交或DNA-RNA雜交,可以檢測突變基因或識別所需的感興趣基因。雜交技術中使用單鏈DNA序列、雙鏈DNA序列、單鏈RNA序列或人工合成的寡核苷酸序列作為探針,這些探針在其5'端用放射性磷標記,以便放射自顯影鑑定或用熒光染料標記。根據所用探頭的類型和所遵循的可視化技術的類型,可以使用不同類型的ISH技術。
ISH在傳染病分子診斷中有著廣泛的應用,主要是為了識別病原菌的存在,並通過分子診斷對病原進行鑑定。它還應用於發育生物學、核型、系統發育分析和染色體物理作圖等領域。
什麼是免疫組織化學(immunohistochemistry (ihc))?
在IHC技術中,分析的主要分子是抗原。在IHC中,單克隆抗體和多克隆抗體用於確定感染或惡性細胞增殖狀態下是否存在抗原。該技術以抗原抗體結合為基礎,酶標用於該技術;其中一個應用是酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。標記物也可以是熒光標記抗體或放射性標記抗體。
IHC廣泛應用於癌細胞檢測。診斷程序以腫瘤細胞上的抗原為靶點來識別和鑑定腫瘤。同樣的程序也用於診斷傳染源。單克隆抗體和多克隆抗體也可用於分析不同的基因產物,方法是使所需的蛋白質與所投的合成抗體之間發生抗體-抗原結合反應。
原位雜交(in situ hybridization)和免疫組織化學(immunohistochemistry)的共同點
- ISH和IHC是高度特異的反應。
- 這兩種技術都非常精確。
- 這兩種技術都可以用於癌症和傳染病的診斷。
- 這些技術是在無菌的體外環境中進行的。
- 這兩種方法都是快速的技術,可以提供可重複的結果。
- ISH和IHC使用諸如放射標記和熒光技術等檢測方法。
原位雜交(in situ hybridization)和免疫組化(immunohistochemistry)的區別
原位雜交與免疫組織化學 | |
ISH是一種直接在組織的一部分或部分或整個組織上進行的核酸雜交技術。 | IHC是一種利用單克隆抗體和多克隆抗體來確定抗原存在的技術,抗原是放置在細胞表面的特殊蛋白質標記物。 |
分析的生物分子類型 | |
ISH分析核酸。 | IHC分析蛋白質抗原。 |
生化反應基礎 | |
DNA-DNA或DNA-RNA之間的互補鹼基配對發生在這種技術中。 | 免疫組化涉及抗原抗體相互作用。 |
酶聯檢測方法 | |
酶聯檢測方法不能用於ISH。 | 酶聯檢測法可用於IHC。 |
總結 - 原位雜交(in situ hybridization) vs. 免疫組化(immunohistochemistry)
分子診斷是一種快速和確證的方法,可以用來識別非傳染性疾病,如癌症或傳染性疾病,如艾滋病毒或結核病,基於分子標記的細胞,導致疾病的表現。分子標記可以以表達蛋白質的形式存在,也可以在遺傳水平上,基於這些技術引入不同的新技術來提高效率,並且不那麼費力,儘管這些技術的成本很高。因此,ISH依賴於DNA-DNA或DNA-RNA雜交形成,IHC依賴於抗體與抗原之間的特異反應。這就是原位雜交的區別。
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引用
1Durayan,Jeyapradha等人。“免疫組織化學的應用”,《藥學與生物化學雜誌》,Medknow Publicati***&Media Pvt Ltd,2012年8月,可在此處查閱。訪問日期:2017年8月24日。“原位雜交(ISH)。”美國國家醫學圖書館國家生物技術信息中心,可在這裡查閱。2017年8月24日訪問。
2“原位雜交(ISH)”,美國國家醫學圖書館,國家生物技術信息中心,