关键区别-原位杂交与免疫组织化学
癌症和传染病诊断是一个流行的趋势,利用新的蛋白质组学和基因组学技术来识别肿瘤或感染性细胞、其增殖和细胞发育部位,并分析大多数传染性和非传染性疾病的遗传基础。这将导致精确的药物加工和设计,并开发针对疾病的定制疗法。原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)是肿瘤生物学中应用最广泛的两种技术,而原位杂交和免疫化学的关键区别在于分析过程中所使用的分子。在ISH中,核酸探针用于分析,而在IHC中,单克隆抗体和多克隆抗体用于诊断测定。
目录
1. 概述和主要区别
2. 什么是原位杂交
3. 什么是免疫组织化学
4. 原位杂交与免疫组织化学的相似性
5. 并列比较-原位杂交与免疫组织化学的表格形式
6. 摘要
什么是原位杂交(in situ hybridization (ish))?
原位杂交是一种直接在组织的一部分或部分、整个组织或细胞中进行的核酸杂交技术。该技术依赖于Watson-Crick互补碱基配对理论,产生DNA-DNA杂交或DNA-RNA杂交,可以检测突变基因或识别所需的感兴趣基因。杂交技术中使用单链DNA序列、双链DNA序列、单链RNA序列或人工合成的寡核苷酸序列作为探针,这些探针在其5'端用放射性磷标记,以便放射自显影鉴定或用荧光染料标记。根据所用探头的类型和所遵循的可视化技术的类型,可以使用不同类型的ISH技术。
ISH在传染病分子诊断中有着广泛的应用,主要是为了识别病原菌的存在,并通过分子诊断对病原进行鉴定。它还应用于发育生物学、核型、系统发育分析和染色体物理作图等领域。
什么是免疫组织化学(immunohistochemistry (ihc))?
在IHC技术中,分析的主要分子是抗原。在IHC中,单克隆抗体和多克隆抗体用于确定感染或恶性细胞增殖状态下是否存在抗原。该技术以抗原抗体结合为基础,酶标用于该技术;其中一个应用是酶联免疫吸附试验(ELISA)。标记物也可以是荧光标记抗体或放射性标记抗体。
IHC广泛应用于癌细胞检测。诊断程序以肿瘤细胞上的抗原为靶点来识别和鉴定肿瘤。同样的程序也用于诊断传染源。单克隆抗体和多克隆抗体也可用于分析不同的基因产物,方法是使所需的蛋白质与所投的合成抗体之间发生抗体-抗原结合反应。
原位杂交(in situ hybridization)和免疫组织化学(immunohistochemistry)的共同点
- ISH和IHC是高度特异的反应。
- 这两种技术都非常精确。
- 这两种技术都可以用于癌症和传染病的诊断。
- 这些技术是在无菌的体外环境中进行的。
- 这两种方法都是快速的技术,可以提供可重复的结果。
- ISH和IHC使用诸如放射标记和荧光技术等检测方法。
原位杂交(in situ hybridization)和免疫组化(immunohistochemistry)的区别
原位杂交与免疫组织化学 | |
ISH是一种直接在组织的一部分或部分或整个组织上进行的核酸杂交技术。 | IHC是一种利用单克隆抗体和多克隆抗体来确定抗原存在的技术,抗原是放置在细胞表面的特殊蛋白质标记物。 |
分析的生物分子类型 | |
ISH分析核酸。 | IHC分析蛋白质抗原。 |
生化反应基础 | |
DNA-DNA或DNA-RNA之间的互补碱基配对发生在这种技术中。 | 免疫组化涉及抗原抗体相互作用。 |
酶联检测方法 | |
酶联检测方法不能用于ISH。 | 酶联检测法可用于IHC。 |
总结 - 原位杂交(in situ hybridization) vs. 免疫组化(immunohistochemistry)
分子诊断是一种快速和确证的方法,可以用来识别非传染性疾病,如癌症或传染性疾病,如艾滋病毒或结核病,基于分子标记的细胞,导致疾病的表现。分子标记可以以表达蛋白质的形式存在,也可以在遗传水平上,基于这些技术引入不同的新技术来提高效率,并且不那么费力,尽管这些技术的成本很高。因此,ISH依赖于DNA-DNA或DNA-RNA杂交形成,IHC依赖于抗体与抗原之间的特异反应。这就是原位杂交的区别。
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引用
1Durayan,Jeyapradha等人。“免疫组织化学的应用”,《药学与生物化学杂志》,Medknow Publicati***&Media Pvt Ltd,2012年8月,可在此处查阅。访问日期:2017年8月24日。“原位杂交(ISH)。”美国国家医学图书馆国家生物技术信息中心,可在这里查阅。2017年8月24日访问。
2“原位杂交(ISH)”,美国国家医学图书馆,国家生物技术信息中心,