转化vs转染
转化和转染是将外源基因导入宿主细胞的两种简单技术。然而,这些技术取决于宿主或载体系统的类型。
什么是细胞转化?
转化是将基因导入酵母和细菌细胞的技术。这种技术通常会导致基因的遗传性改变,因此基因的表达是永久性的。1928年,弗雷德里克·格里菲斯首次提出细菌转化。然后在20世纪70年代早期,这种技术被用于大肠杆菌。在大肠杆菌转化过程中,细胞被浸泡在氯化钙的冰冷溶液中。这一步使大肠杆菌细胞充满活力。然后,将有能力的细胞与质粒DNA混合,在冰上孵育20-30分钟,然后进行短暂的热休克,使DNA能够转移到细胞中。最后,将细胞置于营养肉汤中,在37℃下培养60-90分钟,以建立质粒。一旦这些步骤成功完成,转化的细胞就可以被放置在合适的培养基上进行细胞繁殖。由于转化被认为是一种效率低下的技术,因此它可能不用于克隆库的制备。
什么是细胞转染?
转染是一种将外源基因导入哺乳动物细胞的方法。转染有两种方法,即瞬时转染和稳定转染。在瞬时转染中,基因表达在有限的时间内是有效的,因此,基因的改变会导致暂时的表达。该方法简便、快速,可作为常规方法使用。瞬时转染的一个缺点是难以应用于大规模的蛋白质合成系统。
在稳定的转染过程中,靶基因被整合到宿主细胞的基因组中,因此基因的表达是永久性的,不同于瞬时转染。
转化和转染有什么区别?
•转化是将基因导入原核细胞(细菌和酵母),而转染通常称为将基因导入哺乳动物细胞。