硝化棉(nitrocellulose)和聚偏氟乙烯(pvdf)的區別

Western印跡法是一種可以檢測和定量蛋白質樣本中的特定蛋白質的方法。該技術的可靠性取決於選擇正確的膜從凝膠中吸收蛋白質。有不同類型的微孔膜。由於硝基纖維素膜的特殊性質，研究者們更喜歡使用這種膜。在硝酸纖維素和聚偏氟乙烯之間的選擇也是免疫印跡的另一個挑戰。硝化棉和聚偏氟乙烯都具有較高的蛋白質吸收能力。硝化棉膜和PVDF膜的主要區別在於，硝化棉膜不具有剝離抗體和重複使用抗體的能力，而PVDF膜具有剝離和再利用的能力。

內容1。概述和主要區別2。什麼是硝化纖維素3。什麼是PVDF4。並列比較-硝化纖維素與PVDF5。摘要

什麼是硝化棉(nitrocellulose)？

硝化棉是一種用硝酸處理纖維素製成的聚合物，在分子生物學中被用來**微孔膜，特別是用於諸如southern、northern和western印跡法的微孔膜。硝化纖維素膜的孔徑為3至20µm。硝化纖維素微孔膜有助於檢測膜表面發生的免疫化學反應。因此，硝酸纖維素膜常被用於蛋白質的固定化和蛋白質的免疫印跡檢測。硝化纖維膜也能固定糖蛋白和核酸。

硝化纖維膜在橫向流動分析中是首選的，因為有幾個特點。硝化纖維膜吸收高濃度的蛋白質。用於潤溼膜的溶劑不會減少硝化纖維膜蛋白質的吸收。硝化纖維膜可以很容易地切割成所需的凝膠大小，並通過電或毛細管轉移將蛋白質從凝膠轉移到膜上。硝化棉使蛋白質以較高的結合電位通過膜。硝化纖維顯示出更好的處理強度。硝化纖維膜的另一個特殊特性是，它可以很容易地用非溶劑型耐水膠粘劑粘合到各種塑料背襯上。

圖01：用於western blotting的硝化纖維膜

什麼是聚偏氟乙烯(pvdf)？

聚偏二氟乙烯（PVDF）是由偏二氟乙烯聚合而成的含氟聚合物，具有很高的蛋白質固定能力。因此，用聚偏氟乙烯（PVDF）製成的微孔膜可用於蛋白質混合物**定蛋白質的分析。PVDF膜也可用於氨基酸分析和蛋白質測序。聚偏氟乙烯膜在硝化棉膜上最重要的特點是它可以很容易地從抗體中剝離出來，再用於後續的抗體探針。

PVDF膜比硝化纖維膜厚，因此，在重複使用過程中更耐損壞。PVDF膜具有很強的疏水性。因此，使用前必須用甲醇或異丙醇浸泡。

硝化棉(nitrocellulose)和聚偏氟乙烯(pvdf)的區別

硝化棉vs聚偏氟乙烯
硝化纖維素是由纖維素組成的聚合物。	聚偏氟乙烯是由偏二氟乙烯聚合而成的含氟聚合物。
膜孔徑
典型孔徑為0.1、0.2或0.45μ	典型孔徑為0.1、0.2或0.45μm
蛋白質結合能力
硝化纖維的蛋白質結合能力為80至100μg/cm2。	聚偏氟乙烯的蛋白質結合能力為170至200μg/cm2。
敏感
與PVDF相比，它的靈敏度較低。	這有很高的靈敏度。
低表達蛋白的檢測
由於硝酸纖維素膜的靈敏度較低，不適合檢測低表達的蛋白質。	由於其靈敏度高，更適合於檢測低表達蛋白。
背景噪聲
這有較低的背景噪音	這有更高的背景噪音。
與蛋白質的相互作用
蛋白質分子通過疏水作用與硝化纖維膜結合。	蛋白質通過疏水和偶極相互作用與聚偏氟乙烯膜結合。
膜的性質
硝化棉易碎。然而，硝酸纖維素的版本是可用的，而且它們是抗藥性的。	聚偏氟乙烯更耐用，具有更高的耐化學性。
再利用和剝離能力
硝化纖維在不丟失信號的情況下很難剝離和重製。	PVDF是重製和測序應用的理想選擇。
適用性
硝化棉是檢測低分子量蛋白質的理想材料。	PVDF更適合檢測高分子量的蛋白質。
其他用途
硝酸纖維素可用於核酸分析和斑點/狹縫印跡。	聚偏氟乙烯可用於蛋白質測序和固相分析系統。
成本
這比PVDF膜便宜。	這比硝化棉膜貴。
需要預潤溼
硝化纖維膜不需要甲醇預浸	PVDF膜需要用甲醇預浸。

總結 - 硝化棉(nitrocellulose) vs. 聚偏氟乙烯(pvdf)

硝化棉膜是第一個用於橫向流動分析的膜。它們吸收蛋白質的能力很強。因此，硝酸纖維素膜被用於蛋白質印跡。聚偏氟乙烯（PVDF）是另一種用於western印跡的膜，它還具有很高的蛋白質吸收能力。這兩種類型都用於蛋白質分析的蛋白質印跡。然而，PVDF膜具有更特殊的特性，使其比硝化纖維素膜更適合用於western印跡。但是，硝化纖維膜更適合檢測低分子量蛋白質，PVDF膜更適合檢測高分子量蛋白質。這就是硝化纖維和聚偏氟乙烯膜的區別。

Image Courtesy:
1.”Western blot transfer” By Bensaccount at English Wikipedia (CC BY 3.0) via Comm*** Wikimedia