硝化棉(nitrocellulose)和聚偏氟乙烯(pvdf)的区别

Western印迹法是一种可以检测和定量蛋白质样本中的特定蛋白质的方法。该技术的可靠性取决于选择正确的膜从凝胶中吸收蛋白质。有不同类型的微孔膜。由于硝基纤维素膜的特殊性质，研究者们更喜欢使用这种膜。在硝酸纤维素和聚偏氟乙烯之间的选择也是免疫印迹的另一个挑战。硝化棉和聚偏氟乙烯都具有较高的蛋白质吸收能力。硝化棉膜和PVDF膜的主要区别在于，硝化棉膜不具有剥离抗体和重复使用抗体的能力，而PVDF膜具有剥离和再利用的能力。

内容1。概述和主要区别2。什么是硝化纤维素3。什么是PVDF4。并列比较-硝化纤维素与PVDF5。摘要

什么是硝化棉(nitrocellulose)？

硝化棉是一种用硝酸处理纤维素制成的聚合物，在分子生物学中被用来**微孔膜，特别是用于诸如southern、northern和western印迹法的微孔膜。硝化纤维素膜的孔径为3至20µm。硝化纤维素微孔膜有助于检测膜表面发生的免疫化学反应。因此，硝酸纤维素膜常被用于蛋白质的固定化和蛋白质的免疫印迹检测。硝化纤维膜也能固定糖蛋白和核酸。

硝化纤维膜在横向流动分析中是首选的，因为有几个特点。硝化纤维膜吸收高浓度的蛋白质。用于润湿膜的溶剂不会减少硝化纤维膜蛋白质的吸收。硝化纤维膜可以很容易地切割成所需的凝胶大小，并通过电或毛细管转移将蛋白质从凝胶转移到膜上。硝化棉使蛋白质以较高的结合电位通过膜。硝化纤维显示出更好的处理强度。硝化纤维膜的另一个特殊特性是，它可以很容易地用非溶剂型耐水胶粘剂粘合到各种塑料背衬上。

图01：用于western blotting的硝化纤维膜

什么是聚偏氟乙烯(pvdf)？

聚偏二氟乙烯（PVDF）是由偏二氟乙烯聚合而成的含氟聚合物，具有很高的蛋白质固定能力。因此，用聚偏氟乙烯（PVDF）制成的微孔膜可用于蛋白质混合物**定蛋白质的分析。PVDF膜也可用于氨基酸分析和蛋白质测序。聚偏氟乙烯膜在硝化棉膜上最重要的特点是它可以很容易地从抗体中剥离出来，再用于后续的抗体探针。

PVDF膜比硝化纤维膜厚，因此，在重复使用过程中更耐损坏。PVDF膜具有很强的疏水性。因此，使用前必须用甲醇或异丙醇浸泡。

硝化棉(nitrocellulose)和聚偏氟乙烯(pvdf)的区别

硝化棉vs聚偏氟乙烯
硝化纤维素是由纤维素组成的聚合物。	聚偏氟乙烯是由偏二氟乙烯聚合而成的含氟聚合物。
膜孔径
典型孔径为0.1、0.2或0.45μ	典型孔径为0.1、0.2或0.45μm
蛋白质结合能力
硝化纤维的蛋白质结合能力为80至100μg/cm2。	聚偏氟乙烯的蛋白质结合能力为170至200μg/cm2。
敏感
与PVDF相比，它的灵敏度较低。	这有很高的灵敏度。
低表达蛋白的检测
由于硝酸纤维素膜的灵敏度较低，不适合检测低表达的蛋白质。	由于其灵敏度高，更适合于检测低表达蛋白。
背景噪声
这有较低的背景噪音	这有更高的背景噪音。
与蛋白质的相互作用
蛋白质分子通过疏水作用与硝化纤维膜结合。	蛋白质通过疏水和偶极相互作用与聚偏氟乙烯膜结合。
膜的性质
硝化棉易碎。然而，硝酸纤维素的版本是可用的，而且它们是抗药性的。	聚偏氟乙烯更耐用，具有更高的耐化学性。
再利用和剥离能力
硝化纤维在不丢失信号的情况下很难剥离和重制。	PVDF是重制和测序应用的理想选择。
适用性
硝化棉是检测低分子量蛋白质的理想材料。	PVDF更适合检测高分子量的蛋白质。
其他用途
硝酸纤维素可用于核酸分析和斑点/狭缝印迹。	聚偏氟乙烯可用于蛋白质测序和固相分析系统。
成本
这比PVDF膜便宜。	这比硝化棉膜贵。
需要预润湿
硝化纤维膜不需要甲醇预浸	PVDF膜需要用甲醇预浸。

总结 - 硝化棉(nitrocellulose) vs. 聚偏氟乙烯(pvdf)

硝化棉膜是第一个用于横向流动分析的膜。它们吸收蛋白质的能力很强。因此，硝酸纤维素膜被用于蛋白质印迹。聚偏氟乙烯（PVDF）是另一种用于western印迹的膜，它还具有很高的蛋白质吸收能力。这两种类型都用于蛋白质分析的蛋白质印迹。然而，PVDF膜具有更特殊的特性，使其比硝化纤维素膜更适合用于western印迹。但是，硝化纤维膜更适合检测低分子量蛋白质，PVDF膜更适合检测高分子量蛋白质。这就是硝化纤维和聚偏氟乙烯膜的区别。

Image Courtesy:
1.”Western blot transfer” By Bensaccount at English Wikipedia (CC BY 3.0) via Comm*** Wikimedia