電泳(sds page)和免疫印跡(western blot)的區別
蛋白質印跡法是一種從蛋白質樣本中檢測出特定蛋白質的技術。這項技術是通過幾個關鍵步驟來完成的:凝膠電泳,印跡和雜交。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-Page)是一種根據蛋白質大小(分子量)進行分離的凝膠電泳技術。westernblot是一種特殊的印跡膜,用於在SDS-Page中傳遞相同模式的蛋白質。SDS-Page和western-blot的主要區別在於SDS-Page可以分離混合物中的蛋白質,而western-blot則可以檢測和定量混合物中的特定蛋白質。這兩種方法在蛋白質分析研究中都很有用。
內容1。概述和主要區別2。什麼是SDS第3頁。什麼是Western Blot4。並列比較——SDS-Page與Western Blot5。摘要
什麼是電泳(sds page)?
SDS-Page是一種用於蛋白質分離的凝膠電泳技術。它廣泛應用於生物化學、遺傳學、法醫學和分子生物學。一旦從樣本中提取出蛋白質,它們就會在SDS和聚丙烯酰胺組成的凝膠上運行。SDS是一種陰離子洗滌劑,用於線性化蛋白質(變性蛋白質),並賦予線性化蛋白質與分子量成正比的負電荷。聚丙烯酰胺成為凝膠的固體載體。帶負電的變性蛋白質通過凝膠向儀器的正端遷移。根據蛋白質的大小,蛋白質之間的遷移速度不同,會發生分離。因此,SDS-page有助於根據蛋白質的大小分離單個蛋白質。
製備用於蛋白質分級的聚丙烯酰胺凝膠是SDS-Page的關鍵步驟。聚丙烯酰胺的正確濃度和交聯劑的種類對凝膠的物理性質有很大的影響,這使得不同蛋白質的實際分離成為可能。凝膠的孔徑應適當控制,以便有效分離。然而,SDS-Page被認為是一種高分辨率的蛋白質分離技術。
SDS-Page技術在蛋白質分析中有很大的侷限性。由於SDS在分離前使蛋白質變性,它不允許檢測酶活性、蛋白質結合相互作用、蛋白質輔因子等。
什麼是免疫印跡(western blot)?
Western印跡技術能夠從蛋白質混合物中檢測出特定的蛋白質,並測量蛋白質的數量和分子量。蛋白質印跡是在蛋白質印跡過程中用來獲得蛋白質在SDS-聚丙烯酰胺凝膠中的鏡像圖像的膜。用於western印跡的膜主要由硝化纖維素或聚偏二氟乙烯(PVDF)組成。帶轉移蛋白的膜可以用來鑑定所需的蛋白質。通過雜交檢測所需的蛋白質需要高質量的抗體。抗體與它的特**抗原結合,顯示出所需抗原的存在,這是一種蛋白質。
蛋白質從SDS聚丙烯酰胺凝膠轉移到western印跡是通過電印跡來完成的。這是一種快速有效的方法,使蛋白質從凝膠中電泳出來並傳遞到硝酸纖維素膜上(western blot)。
電泳(sds page)和免疫印跡(western blot)的區別
SDS-Page與Western印跡 | |
SDS-Page是一種凝膠電泳技術。 | Western blot是一種在膜上檢測混合物**定蛋白質的技術。 |
使用 | |
SDS-page可以根據蛋白質的大小進行分離。 | westernblot允許蛋白質在SDS-page凝膠上轉移而不改變其模式,並允許與特定抗體雜交。 |
缺點 | |
蛋白質變性、成本高、存在神經毒素化學物質是該技術的缺點。 | 這項技術非常耗時,需要經驗豐富的個人和特定的控制條件。 |
總結 - 電泳(sds page) vs. 免疫印跡(western blot)
SDS-page和westernblot是蛋白質分析的兩種方法。SDS-Page可根據蛋白質分子量在凝膠上輕鬆分離蛋白質。westernblot有助於通過與特**抗體雜交來確認特定蛋白的存在和數量。這是SDS-Page和westernblot的區別。
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