Klenow與t4dna聚合酶的主要區別在於Klenow片段是大腸桿菌DNA聚合酶1的大片段,而t4dna聚合酶是噬菌體T4的DNA聚合酶1。
DNA聚合酶是一種酶,通過在已有引物的3′-OH端加入脫氧核糖核酸來催化DNA的形成。有不同類型的DNA聚合酶。大多數用於分子生物學的DNA聚合酶都是原核DNA聚合酶。Klenow片段和t4dna聚合酶是兩種具有原核起源的DNA聚合酶。Klenow片段是由枯草桿菌蛋白酶將大腸桿菌DNA聚合酶1切割成兩個片段而產生的大片段。t4dna聚合酶是T4噬菌體的DNA聚合酶1。Klenow和t4dna聚合酶均具有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。它們都缺乏5′→3′核酸外切酶活性,更適合於分子生物學的許多應用。
目錄
1. 概述和主要區別
2. 現在是什麼
3. 什麼是T4 DNA聚合酶
4. Klenow與t4dna聚合酶的相似性
5. 並列比較-Klenow與T4 DNA聚合酶的表格形式
6. 摘要
什麼是克萊諾(klenow)?
Klenow片段是一種在分子生物學中有用的DNA聚合酶。當大腸桿菌DNA聚合酶1被細菌蛋白酶(subtilisin)水解時,會產生兩個片段:一個是大片段,另一個是小片段。Klenow片段是大小為68kda的大片段。Klenow片段具有DNA PolⅠ的5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶(校對)活性。Klenow片段的3′→5′核酸外切酶活性有助於在聚合過程中去除錯誤添加的鹼基。Klenow片段不含5′→3′核酸外切酶活性,由全長或完整的大腸桿菌DNA聚合酶1表達。當僅需要聚合活性時是有利的。Klenow片段用於填充5'外伸、探針合成、DNA測序、雙鏈DNA合成、cDNA第二鏈合成和定點突變。
在某些應用中,Klenow片段的3′→5′核酸外切酶活性也變得不理想。它可以通過在編碼Klenow片段的基因中引入突變來去除。由此產生的Klenow片段稱為exo Klenow片段。因此,exo-Klenow片段僅具有大腸桿菌聚合酶1的5′→3′聚合酶活性。
什麼是t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)?
t4dna聚合酶是一種催化DNA合成的DNA聚合酶。它是一種由噬菌體T4編碼的蛋白質。在結構上,t4dna聚合酶是一種898個氨基酸殘基的蛋白質(分子量為103.6kda)。它需要一個模板和一個引物來催化合成。
與Klenow片段相似,t4dna聚合酶同時具有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。此外,它還缺乏5′→3′核酸外切酶活性。t4dna聚合酶可用於DN**段5′突端的填充。也常用於雙鏈DNA的5′端或3′端標記。t4dna聚合酶常用於鈍性克隆。t4dna聚合酶的3′→5′核酸外切酶(校對)活性比Klenow片段強200倍以上。最重要的是,t4dna聚合酶具有高的過程性(每秒400個核苷酸)。
克萊諾(klenow)和t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)的共同點
- Klenow和t4dna聚合酶是兩種原核聚合酶。
- 兩種聚合酶都具有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。
- 它們不具有5′→3′核酸外切酶活性。
- 這兩種酶都需要模板和引物來催化DNA的合成。
- 這些酶在75 0℃下可被熱滅活
克萊諾(klenow)和t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)的區別
Klenow和t4dna聚合酶之間的關鍵區別在於每種酶的來源。Klenow片段來源於一種細菌,而t4dna聚合酶來源於一種病毒噬菌體。t4dna聚合酶比Klenow片段具有更高的過程性。此外,t4dna聚合酶比Klenow片段具有較強的校對活性。因此,這是Klenow和t4dna聚合酶之間的另一個區別。
下面的信息圖表以表格形式列出了Klenow和T4 DNA聚合酶之間的更多差異。
總結 - 克萊諾(klenow) vs. t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)
Klenow片段是大腸桿菌DNA聚合酶1的一個大片段。它只有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。缺乏完整大腸桿菌DNA pol1的5′→3′核酸外切酶活性。因此,Klenow片段是一種細菌聚合酶。另一方面,t4dna聚合酶是由噬菌體T4編碼的聚合酶。與Klenow片段相似,它同時含有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性,缺乏5′→3′核酸外切酶活性。然而,t4dna聚合酶比Klenow片段具有更高的過程性和校對活性。所以,這是Klenow和t4dna聚合酶的關鍵區別。
引用
1DNA聚合酶,T4.《DNA聚合酶,T4–沃辛頓酶手冊》,可在此處獲得。2。麗蒂,勞爾和伯納德·佩巴爾。“分子生物學中使用的酶:有用的指南”,《細胞通訊與信號學雜誌》,荷蘭施普林格出版社,2008年6月,可在這裡查閱。
2麗蒂,勞爾和伯納德·佩巴爾。“分子生物學中使用的酶:有用的指南”,《細胞通訊與信號學雜誌》,荷蘭施普林格出版社,2008年6月,