向前地(forward)和反向底漆(reverse primer)的區別

關鍵區別-正向和反向啟動

聚合酶鏈反應（PCR）是一種應用於分子生物學的DNA擴增方法。這是一種常用的技術，可以將一個特別感興趣的DNA序列複製成數百萬到數十億個拷貝。這是一種在實驗室進行的體外方法。PCR技術完全依賴於商業生產的稱為Taq聚合酶的DNA聚合酶。它還需要其他幾個部件和適當的溫度維持。一個重要的組成部分是引物。引物是專為目標DNA序列設計的短DNA序列。它們的長度通常在20個核苷酸左右。Taq聚合酶催化將核苷酸加入到已有的核苷酸序列中。因此，引物是合成新鏈的起點。Taq聚合酶只在5'到3'方向工作，因此DNA的合成也發生在相同的5'到3'方向。由於DNA是雙鏈的，PCR需要兩種引物。它們被稱為正向底漆和反向底漆。正向引物和反向引物是根據DNA合成時引物在DNA中的延伸方向來命名的。前向引物與反義DNA鏈退火，並啟動基因+ve鏈的合成，使其向5′至3′方向合成。反向引物退火與正義鏈，並開始合成互補鏈的編碼鏈；這是-ve鏈的基因鏈到5'至3'方向。這是正向引物和反向引物之間的關鍵區別。

什麼是前向***(a forward primer)？

正向定向是基因編碼鏈或意義鏈的合成。Taq聚合酶催化5'到3'方向的新鏈的合成。當引物與非編碼鏈或反義鏈退火併沿5′到3′方向伸長時，編碼鏈的合成就發生了。

圖01：正向和反向底漆

與反義鏈、非編碼鏈或模板鏈退火的引物稱為前向引物，因為前向引物是合成基因編碼鏈或正鏈的起點。前向引物有一個短的核苷酸序列，與反義鏈的3'側端互補。它與反義鏈雜交併促進Taq聚合酶添加與模板鏈互補的核苷酸。

什麼是反向起爆劑(a reverse primer)？

反向引物（Reverse primer）是一種短的DNA序列，它與3′端的正義鏈或編碼鏈進行退火。反向引物是合成編碼序列或非編碼序列互補鏈的起點。反向引物的設計與編碼鏈的3'端互補。因此，它與編碼鏈兩側3'端退火，並允許Taq聚合酶合成反義鏈或模板鏈。由於它的方向是相反的，所以這個底漆被標記為反向底漆。

這兩個重要的引物的目標區域都是數十億的正向或反向拷貝。

向前地(forward)和反向底漆(reverse primer)的共同點

正、反向引物均由寡核苷酸組成。
正向和反向引物都具有短的核苷酸序列，與DNA雙鏈的側端互補。
正向和反向引物通常由20個核苷酸組成。
正向和反向引物都用於聚合酶鏈反應。
正、反向引物均已商業化合成。
正向和反向引物溫度穩定，通常具有相似的Tm。
正向和反向引物均與目標DNA序列退火。
根據PCR反應設計了正向和反向引物。
正向和反向引物都是DNA擴增的起點。
反向和正向引物對於產生數百萬個特定區域的靶向或感興趣的DNA序列非常重要。

向前地(forward)和反向底漆(reverse primer)的區別

正向底漆與反向底漆
前向引物（Forward primer）是與基因的非編碼序列或模板鏈的3'端雜交，作為合成編碼序列的起點的短DNA序列。	反向引物（Reverse primer）是指與編碼的3′端或非模板鏈雜交，作為合成非編碼序列的起點的短DNA序列。
退火鋼絞線
帶模板鏈的前底漆退火。	用非模板鋼絞線進行反向底漆退火。
生成新序列
前向引物有助於編碼序列的合成。	反向引物有助於非編碼序列的合成。

總結 - 向前地(forward) vs. 反向底漆(reverse primer)

PCR技術涉及兩種類型的引物。它們是正向和反向引物。根據新DNA鏈合成中引物的延伸率，對這些引物進行標記或命名。Taq聚合酶以5'到3'方向合成新的DNA。因此，引物設計為與雙鏈的3'端互補。前向引物與反義序列、模板或非編碼序列的3′端雜交。它是合成編碼序列的起點。反向引物以5'到3'方向伸長，與編碼的3'端或非模板或感覺鏈雜交。它是合成非編碼序列的起點。這就是前進檔和倒車檔的區別。