尼克翻譯公司(nick translation)和端部填充(end filling)的區別

缺口翻譯和末端填充的關鍵區別在於，缺口翻譯是一種為各種雜交反應創建標記的DNA探針的過程，而末端填充是一種通過在單鏈懸垂中添加核苷酸來生成鈍化片段的技術。

缺口翻譯和末端填充是分子生物學中常用的兩種技術。缺口翻譯用於標記雜交探針，以檢測特定的核苷酸序列。端部填充被用來**鈍的碎片，這些碎片有粘性的末端和單股的懸垂部分。這兩種技術都非常重要，它們通常在分子研究實驗室中進行。

什麼是尼克翻譯公司(nick translation)？

缺口翻譯是一種重要的DNA標記方法，用於製備各種分子生物學技術，如印跡法、原位雜交法、熒光原位雜交法等。DNA探針用於識別特定的DNA或RNA序列。在標記探針的幫助下，可以從複雜的核酸混合物中標記或可視化特定片段。因此，使用各種技術製備標記探針。缺口翻譯是一種利用DNA酶1和DNA聚合酶1酶產生標記探針的方法。

尼克翻譯公司(nick translation)和端部填充(end filling)的區別

圖01：尼克翻譯

缺口翻譯過程始於DNase-1酶的活性。DNase 1通過切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵，在雙鏈DNA的磷酸主鏈上引入刻痕。一旦缺口形成，核苷酸的3′OH自由基將產生，DNA聚合酶1酶將作用於它。DNA聚合酶1的5′至3′核酸外切酶活性從缺口處向DNA鏈的3′方向去除核苷酸。

同時，DNA聚合酶1酶的多聚酶活性起作用，並添加核苷酸來取代去除的核苷酸。如果核苷酸被標記，則被標記的核苷酸取代，並標記DNA以供識別。最後，這種新合成的標記DNA可作為探針用於各種雜交反應。

什麼是端部填充(end filling)？

末端填充是分子生物學中用來**鈍化碎片的一種技術。限制性消化產生帶有懸垂物的碎片。這些片段可能與連接到質粒載體上不相容。矢量通常被鈍化，以允許連接不兼容的端部。因此，可以通過在互補鏈上添加核苷酸來鈍化具有懸垂的片段，並將其作為聚合模板。這就是所謂的結束填充過程。

DNA聚合酶I和T4 DNA聚合酶的Klenow片段等DNA聚合酶對末端填充起催化作用。他們加入核苷酸來填充（5′→3′），然後咀嚼（3′→5′）。一旦粘性的末端被填滿，它們就會變得鈍，並且準備將其連成向量。

此外，末端填充可以用來標記DNA分子。然而，它只能用來標記帶有粘性末端的DNA分子。與缺口翻譯相比，末端填充是一種溫和的方法，很少導致DNA斷裂。

尼克翻譯公司(nick translation)和端部填充(end filling)的共同點

缺口翻譯和末端填充都是分子生物學技術。
它們可以用來標記探針。
兩者都是體外培養的

尼克翻譯公司(nick translation)和端部填充(end filling)的區別

缺口翻譯是一種為雜交創造標記探針的技術。相反，端部填充是一種技術，它能產生鈍的碎片，用於連接成載體。所以，這就是刻痕翻譯和結尾填充的關鍵區別。此外，缺口翻譯需要使用5′至3′核酸外切酶活性，而端部填充不需要5′至3′核酸外切酶活性。

下面的信息圖表更詳細地列出了切口翻譯和結尾填充之間的差異。

尼克翻譯公司(nick translation)和端部填充(end filling)的區別

總結 - 尼克翻譯公司(nick translation) vs. 端部填充(end filling)

缺口翻譯是一種將放射性標記的核苷酸結合到DNA中的方法。它根據DNA酶1和大腸桿菌DNA聚合酶1酶的活性合成標記探針。另一方面，末端填充是一種產生鈍碎片的技術。當碎片有粘性末端（單股懸垂物）時，有必要使其鈍端以便連接成載體。末端填充增加了相容的核苷酸，併產生鈍的末端片段，以便使它們與結紮相兼容。因此，本文總結了缺口翻譯和結尾填充的區別。