關鍵區別——dna和rna提取
DNA和RNA的研究是理解分子生物學、生物技術和遺傳學的基本概念的重要方面。提取純DNA和RNA樣本是必要的,以便在這些研究中進行實驗程序。DNA提取和RNA提取的關鍵區別在於DNA提取過程淨化DNA,RNA提取純化RNA。DNA提取過程有三個不同的步驟:細胞膜脂和蛋白質的分解代謝、濃鹽溶液中分解代謝物的**和DNA與乙醇的沉澱。三步程序可包括兩個可選步驟。RNA純化過程包括四個步驟:加入硫氰酸胍進行細胞裂解、蛋白質變性(包括核糖核酸酶)、加入氯仿和苯酚分離RNA以及用乙醇洗滌沉澱。
目錄
1. 概述和主要區別
2. 什麼是DNA提取
3. 什麼是RNA提取
4. DNA和RNA提取的相似性
5. 並列比較-DNA和RNA提取的表格形式
6. 摘要
什麼是dna提取(dna extraction)?
DNA提取是從樣品中提取DNA的物理化學過程。DNA提取是分子生物學和法醫學研究的一個重要方面。這個過程包括三個基本步驟。首先,應該獲得感興趣的細胞。接下來,細胞裂解是為了打破細胞膜,打開細胞,使細胞質和DNA一起暴露。表面活性劑或其他清潔劑可用於溶解細胞膜上的脂質,而蛋白質則被蛋白酶分解。這是可選步驟。一旦細胞被溶解,高濃度的鹽溶液會促進分解後分子的**。然後對溶液進行離心分離,從DNA中分離出碎片塊。在這個階段,分化的DNA與細胞週期中使用的試劑和鹽混合。
為了進一步淨化它,可以使用以下步驟。一種方法是乙醇沉澱法,即將冰凍的乙醇與分離的DNA樣本混合。DNA不溶於酒精,因此由於DNA分子**在一起而產生顆粒。在此過程中加入乙酸鈉,通過增加離子強度來提高沉澱度。除乙醇沉澱法外,苯酚氯仿萃取法也可用於此。在這種方法中,苯酚使樣品中的蛋白質變性。一旦離心,變性蛋白質將保留在有機相中,而與氯仿混合的DNA分子將存在於水相中。氯仿可以去除苯酚殘留物。提取完成後,DNA保持溶解在TE緩衝液或超純水中。
什麼是rna提取(rna extraction)?
RNA純化是從生物樣品中純化RNA的過程。由於核糖核酸酶存在於細胞和組織中,這一過程非常複雜。核糖核酸酶具有快速降解RNA的能力。核糖核酸酶的化學性質非常穩定,很難使其失活。中和核糖核酸酶是一種選擇。由於這種酶在細胞和組織中普遍存在,人們開發了提取RNA的特殊技術。在眾多方法中,最常用的方法是硫氰酸胍-苯酚-氯仿萃取。
硫氰酸胍-苯酚-氯仿萃取法採用離心-相分離法。要離心的混合物由水樣品和水飽和溶液組成,水飽和溶液由苯酚和氯仿組成。離心後,溶液在中性pH條件(pH 7-8)下由上部水相和下部有機相組成。RNA存在於水相中。有機相通常由溶解在苯酚中的蛋白質和溶解在氯仿中的脂類組成。加入了一種朝向性試劑(一種能夠打破水分子間氫鍵的分子);這就是所謂的硫氰酸胍。這種試劑能夠使蛋白質變性,其中包括核糖核酸酶,這些核糖核酸酶可以降解RNA,並參與細胞裂解。它還能從核糖體蛋白質中分離出rRNA。RNA純化的最後一步是用乙醇洗滌水相的沉澱。RNA也可以用液氮純化。
dna(dna)和rna提取(rna extraction)的共同點
- 兩種提取過程都使用有害化學物質,如苯酚和氯仿。
- 離心分離是兩種過程的基本技術。
- 乙醇用於洗滌沉澱,並獲得純化的DNA或RNA。
dna(dna)和rna提取(rna extraction)的區別
DNA與RNA提取 | |
DNA提取是從生物體或樣品中提取DNA的過程。 | RNA提取是從樣品中提取RNA的過程。 |
臺階 | |
DNA提取過程由三個不同的步驟和兩個可選步驟組成。 | RNA提取過程由四個不同的步驟組成。 |
試劑 | |
表面活性劑、蛋白酶(可選)、乙醇、氯仿、苯酚、乙酸鈉用於DNA提取。 | 用硫氰酸胍、氯仿、苯酚、乙醇提取RNA。 |
總結 - dna(dna) vs. rna提取(rna extraction)
DNA和RNA的提取是分子生物學、遺傳學和生物技術研究的重要實驗步驟。這兩種方法都涉及相似的試劑,但是RNA提取使用一種特殊的試劑硫氰酸胍,這種試劑會降低核糖核酸酶的活性。這就是DNA和RNA提取的主要區別。
下載pdf版本的dna vs rna提取
你可以下載這篇文章的PDF版本,並按照引文說明離線使用。請在這裡下載PDF版本的DNA和RNA提取的區別
引用
1Chomczynski,P和N Sacchi。“酸胍-硫氰酸鹽-苯酚-氯仿萃取一步分離RNA的方法”,分析生物化學,美國國家醫學圖書館,1987年4月,可在這裡查閱。查閱日期:2017年8月31日。辛達維語。“DNA、RNA和蛋白質提取:過去和現在”,生物醫藥研究國際,2009年11月30日,印達威,可在這裡查閱。2017年8月31日查閱。
2辛達維語。“DNA、RNA和蛋白質提取:過去和現在”,生物醫學研究國際,新達威,2009年11月30日,