什么是elisa检测？(elisa detection?)
酶联免疫吸附试验（ELISA）是在免疫学实验室进行的一种试验，用于确定生物样品中的蛋白质水平。ELISA检测是指将透明溶液或底物添加到含有结合酶标记抗体的塑料板中的试验的最后一步。酶会分解底物并发生颜色变化。然后在ELISA读板器或分光光度计上测量最终有色溶液的光吸收率。
酶联免疫吸附试验有多种类型，其中最常见的两种是间接酶联免疫吸附试验和捕获或夹心酶联免疫吸附试验。间接ELISA用于检测患者血清中的一种称为抗体的蛋白质。间接ELISA试验的一个例子是用于检测HIV抗体的人类免疫缺陷病毒（HIV）试验。夹心ELISA试验通过在两种抗体之间捕获蛋白质或抗原来检测蛋白质或抗原。通过夹心ELISA试验检测妊娠期间升高的人绒毛膜促性腺激素（hCG）。。
两种试验在试验结束时都有ELISA检测步骤。这一步包括添加一种抗体，该抗体上附着有一个酶分子。添加酶标记抗体后，添加含有该酶特异性底物分子的无色溶液。酶分解底物分子，溶液颜色根据所用的组合而变化。通过测量颜色变化的强度来确定患者样本中抗体或抗原的数量。。
有几种酶-底物组合可用于ELISA检测步骤。最常见的酶是辣根过氧化物酶（HRP），它可以分解底物分子邻苯二胺盐酸盐（OPD）和四甲基联苯胺（TMB）等。OPD和TMB的切割都会导致黄色，这些底物的光密度或光吸收率由ELISA读板器测量。OPD的光吸收率在490纳米（nm）的波长下测量，而TMB在450纳米处测量。。
ELISA检测步骤中使用的另一种常见酶是碱性磷酸酶。这种酶和底物对硝基苯磷酸酯（PNPP）一起使用，也产生黄色溶液。PNPP吸收波长为405nm的光。
酶-底物组合的选择通常基于市场上可买到的酶标记抗体，以及用于测量光吸收率的设备。ELISA检测的多种组合使ELISA检测具有高度的通用性。它是疾病检测和研究实验室的重要工具。
- 发表于 2022-01-10 23:17
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- 分类：健康医疗
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