瞬變(transient)和穩定轉染(stable transfection)的區別
轉染是利用化學或物理方法對真核細胞進行基因轉移的過程。轉染可分為瞬時轉染和穩定轉染兩大類。在瞬時轉染過程中,感興趣的基因無法與宿主基因組整合,在宿主內短暫表達,而在穩定轉染中,感興趣基因與宿主基因組整合並在數代中長期維持。這是瞬時轉染和穩定轉染的關鍵區別。在這兩種情況下,轉染成功,基因得到表達。
內容1。概述和主要區別2。什麼是短暫的轉染。什麼是穩定轉染4。並行比較-瞬時轉染與穩定轉染5。摘要
什麼是瞬時轉染(transient transfection)?
轉染是將基因導入真核細胞的重要手段。在這兩種類型的轉染中,瞬時轉染是一種常見的基因轉移方式。通過載體,外源基因在宿主細胞內轉化。一旦外源DNA進入宿主細胞,它有兩種選擇。它既可以與宿主基因組整合並複製,也可以留在體內而不整合到基因組中。瞬時轉染表現出**基因的暫時性表達,而不整合到宿主基因組中。基因表達併產生編碼的蛋白質直到細胞分裂。然而,由於無法整合,它無法複製並進入後代。這種類型的轉染在短時間內是成功的。在細胞分裂過程中或由於其他因素,外源DNA會發生降解。當外源DNA以高度捲曲的DNA形式出現時,顯示瞬時轉染。
![瞬變(transient)和穩定轉染(stable transfection)的區別1 瞬變(transient)和穩定轉染(stable transfection)的區別](https://ww2.sinaimg.cn/large/007Ys3FFgy1h1o8eq2qycj30af091aa7.jpg)
圖01:瞬時轉染
什麼是穩定轉染(stable transfection)?
穩定轉染表明外源基因成功整合到宿主基因組中。一旦外源DNA進入宿主細胞,部分外源DNA與宿主基因組整合併成為宿主基因組的一部分。因此,當宿主基因組複製時,外來DNA也會複製並傳遞給後代。這種類型的轉染是複雜和罕見的。然而,由於穩定轉染到基因組中,這種特性可以持續數代。
穩定的轉染是一個困難的過程,需要有效地將DNA和細胞獲得的外源DNA導入其基因組。因此,線性DNA比環狀DNA更有利於穩定的轉染。然而,穩定的轉染率約為104個轉化細胞中的一個。通過選擇性標記的共轉染和在培養基上進行人工選擇,可以觀察到穩定的轉染。
![瞬變(transient)和穩定轉染(stable transfection)的區別2 瞬變(transient)和穩定轉染(stable transfection)的區別](https://wx2.sinaimg.cn/large/007Ys3FFgy1h1o8eqkz8jj309l08bglr.jpg)
圖02:穩定轉染
瞬變(transient)和穩定轉染(stable transfection)的區別
瞬時轉染與穩定轉染 | |
外源DNA不能整合到宿主基因組中。 | 外源DNA與宿主基因組整合成為宿主基因組的一部分。 |
主機內的複製 | |
瞬時轉染的基因不會在宿主內複製。所以基因不會傳給下一代。 | 基因在宿主內複製並傳給後代。 |
基因表達的持續時間 | |
基因在一個有限的時間段內被表達出來,然後就被破壞了。 | 基因成為基因組的一部分,並在這一代人中長期表達。 |
使用 | |
這對於研究基因或基因產物短期表達的影響是有用的。 | 這對於長期研究基因表達的影響是有用的。 |
轉染檢測 | |
基因是表達的,通過**報告基因可以很容易地檢測到。 | 通過**一個可選擇的標記物並通過人工選擇在培養基上進行選擇,可以很容易地檢測到穩定的轉染。 |
發生和過程 | |
瞬時轉染是常見的,並不複雜。 | 穩定的轉染很少發生,而且操作複雜。 |
DNA的性質 | |
高度超螺旋DNA適合於瞬時轉染。 | 線性DNA適合穩定轉染。 |
應用 | |
這是用來研究基因敲除或沉默與抑制核糖核酸,蛋白質生產小規模 | 這是用於蛋白質生產的大規模、長期的藥理學研究、基因治療、長期基因調控機制的研究 |
總結 - 瞬變(transient) vs. 穩定轉染(stable transfection)
瞬時轉染和穩定轉染是基因通過非病毒載體系統轉入真核細胞的兩種類型的轉染。外源DNA在瞬時轉染時不與宿主基因組整合,而穩定轉染時與宿主基因組整合。環狀螺旋DNA顯示為瞬時轉染,而線性DNA更傾向於穩定轉染。這就是瞬時轉染和穩定轉染的區別。然而瞬時轉染比穩定轉染更為常見和容易。但兩者之間的選擇取決於基因轉移的目的和研究項目的持續時間。