堆積凝膠(stacking gel)和分離膠(separating gel)的區別

關鍵區別–堆積凝膠與分離凝膠

在解釋SDS-PAGE技術時，使用了“堆積凝膠”和“分離凝膠”兩個術語。SDS-PAGE或十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳是一種根據分子量分離蛋白質分子的實驗室技術。這項技術背後的理論是，不同分子量的蛋白質表現出不同的遷移率；低分子量分子遷移較快，而高分子量分子遷移緩慢。遷移的介質是凝膠。凝膠分為堆積凝膠和分離凝膠兩種。堆積凝膠和分離凝膠的主要區別在於，堆積凝膠的pH值為6.8，而分離凝膠的pH值為8.8。

什麼是堆積凝膠(stacking gel)？

在SDS-PAGE技術中，疊層凝膠是一種低濃度的聚丙烯酰胺凝膠，它位於高濃度分離凝膠（分離凝膠）的頂部。利用堆積凝膠提高電泳分辨率。由於堆積凝膠和分解凝膠的濃度不同，對樣品中的蛋白質有影響，因此分辨率提高。由於聚丙烯酰胺在堆積凝膠中的濃度較低，其孔徑較大。這也有助於增加分離。

堆積凝膠是一種鬆散的聚丙烯酰胺凝膠，其大孔隙約為7%的聚丙烯酰胺。這些孔對大蛋白分子並沒有起到相當大的屏障作用。因此，這種凝膠對這些蛋白質的流動性有輕微的影響。這是根據蛋白質的流動性和大小將其濃縮在兩個凝膠之間進行分離。

堆積凝膠(stacking gel)和分離膠(separating gel)的區別

圖01:SDS-PAGE丙烯酰胺凝膠

堆積凝膠的pH值為6.8。它的pH值比分解凝膠的pH值高2個pH單位。這個pH值意味著較低的離子強度，因此具有較高的電阻。這比凝膠中其他帶電粒子更能激發蛋白質的流動性。

什麼是分離膠(separating gel)？

SDS-page技術中的分離膠或分離膠是一種高濃度的聚丙烯酰胺凝膠，放置在低濃度堆積膠的頂部。分離凝膠中含有大量的聚丙烯酰胺（10%）。該凝膠的pH值保持在pH=8.8，比堆積凝膠的pH值高。

圖02：凝膠電泳儀

當蛋白質分子到達分離凝膠時，由於分離凝膠是一種孔徑較小的高濃度凝膠，對蛋白質分子的運動起到相當大的屏障作用，因此這些分子的遷移速度減慢。這種慢化使其他蛋白質緩慢遷移以趕上，從而在兩種凝膠之間形成一條狹窄、集中的帶。

什麼是堆積膠與分離膠的關係(the relati***hip between stacking gel and separating gel)？

在同一裝置中使用堆積凝膠和分離凝膠兩種類型。

堆積凝膠(stacking gel)和分離膠(separating gel)的區別

堆積膠vs分離膠
在SDS-PAGE技術中，疊層凝膠是一種低濃度的聚丙烯酰胺凝膠，它位於高濃度分離凝膠（分離凝膠）的頂部。	SDS-PAGE技術中的分離凝膠或分離凝膠是一種高濃度的聚丙烯酰胺凝膠，放置在低濃度堆積凝膠的頂部。
安置
將堆積凝膠放置在分離（分離）凝膠上。	分離膠放置在用於凝膠電泳的容器底部。
集中
堆積凝膠濃度高。	分離膠濃度低。
聚丙烯酰胺含量
堆積凝膠含有約7%的聚丙烯酰胺。	分離凝膠含有約10%的聚丙烯酰胺。
酸鹼度
堆積凝膠的pH值為6.8。	分離凝膠的pH值為8.8。
孔徑
堆積凝膠中存在較大的孔徑。	分離凝膠中存在小孔徑。
分辨率
堆積凝膠提供更好的分辨率。	分離凝膠的分辨率很低。

總結 - 堆積凝膠(stacking gel) vs. 分離膠(separating gel)

堆積凝膠和分離凝膠是兩種聚丙烯酰胺凝膠，用於在給定樣品中更好地分離蛋白質分子。堆積膠與分離膠的區別在於，堆積膠的pH值為6.8，而分離膠的pH值為8.8。

引用

1.“聚丙烯酰胺凝膠電泳”。聚丙烯酰胺凝膠電泳（理論）：分子生物學虛擬實驗室II：生物技術和生物醫學工程：Amrita Vishwa Vidyapeetham虛擬實驗室。可在此處獲取2.“SDS-PAGE如何工作。”Bitesize Bio，2018年2月16日。這裡提供3。“SDS-PAGE堆疊凝膠-BICH 608（Polymanis Pettigrew）。”谷歌網站。此處提供
2.“SDS-PAGE工作原理”，《Bitesize Bio》，2018年2月16日。
3.“SDS-PAGE堆疊凝膠-BICH 608（Polymanis Pettigrew）。”谷歌網站。