堆积凝胶(stacking gel)和分离胶(separating gel)的区别

关键区别–堆积凝胶与分离凝胶

在解释SDS-PAGE技术时，使用了“堆积凝胶”和“分离凝胶”两个术语。SDS-PAGE或十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种根据分子量分离蛋白质分子的实验室技术。这项技术背后的理论是，不同分子量的蛋白质表现出不同的迁移率；低分子量分子迁移较快，而高分子量分子迁移缓慢。迁移的介质是凝胶。凝胶分为堆积凝胶和分离凝胶两种。堆积凝胶和分离凝胶的主要区别在于，堆积凝胶的pH值为6.8，而分离凝胶的pH值为8.8。

什么是堆积凝胶(stacking gel)？

在SDS-PAGE技术中，叠层凝胶是一种低浓度的聚丙烯酰胺凝胶，它位于高浓度分离凝胶（分离凝胶）的顶部。利用堆积凝胶提高电泳分辨率。由于堆积凝胶和分解凝胶的浓度不同，对样品中的蛋白质有影响，因此分辨率提高。由于聚丙烯酰胺在堆积凝胶中的浓度较低，其孔径较大。这也有助于增加分离。

堆积凝胶是一种松散的聚丙烯酰胺凝胶，其大孔隙约为7%的聚丙烯酰胺。这些孔对大蛋白分子并没有起到相当大的屏障作用。因此，这种凝胶对这些蛋白质的流动性有轻微的影响。这是根据蛋白质的流动性和大小将其浓缩在两个凝胶之间进行分离。

堆积凝胶(stacking gel)和分离胶(separating gel)的区别

图01:SDS-PAGE丙烯酰胺凝胶

堆积凝胶的pH值为6.8。它的pH值比分解凝胶的pH值高2个pH单位。这个pH值意味着较低的离子强度，因此具有较高的电阻。这比凝胶中其他带电粒子更能激发蛋白质的流动性。

什么是分离胶(separating gel)？

SDS-page技术中的分离胶或分离胶是一种高浓度的聚丙烯酰胺凝胶，放置在低浓度堆积胶的顶部。分离凝胶中含有大量的聚丙烯酰胺（10%）。该凝胶的pH值保持在pH=8.8，比堆积凝胶的pH值高。

图02：凝胶电泳仪

当蛋白质分子到达分离凝胶时，由于分离凝胶是一种孔径较小的高浓度凝胶，对蛋白质分子的运动起到相当大的屏障作用，因此这些分子的迁移速度减慢。这种慢化使其他蛋白质缓慢迁移以赶上，从而在两种凝胶之间形成一条狭窄、集中的带。

什么是堆积胶与分离胶的关系(the relati***hip between stacking gel and separating gel)？

在同一装置中使用堆积凝胶和分离凝胶两种类型。

堆积凝胶(stacking gel)和分离胶(separating gel)的区别

堆积胶vs分离胶
在SDS-PAGE技术中，叠层凝胶是一种低浓度的聚丙烯酰胺凝胶，它位于高浓度分离凝胶（分离凝胶）的顶部。	SDS-PAGE技术中的分离凝胶或分离凝胶是一种高浓度的聚丙烯酰胺凝胶，放置在低浓度堆积凝胶的顶部。
安置
将堆积凝胶放置在分离（分离）凝胶上。	分离胶放置在用于凝胶电泳的容器底部。
集中
堆积凝胶浓度高。	分离胶浓度低。
聚丙烯酰胺含量
堆积凝胶含有约7%的聚丙烯酰胺。	分离凝胶含有约10%的聚丙烯酰胺。
酸碱度
堆积凝胶的pH值为6.8。	分离凝胶的pH值为8.8。
孔径
堆积凝胶中存在较大的孔径。	分离凝胶中存在小孔径。
分辨率
堆积凝胶提供更好的分辨率。	分离凝胶的分辨率很低。

总结 - 堆积凝胶(stacking gel) vs. 分离胶(separating gel)

堆积凝胶和分离凝胶是两种聚丙烯酰胺凝胶，用于在给定样品中更好地分离蛋白质分子。堆积胶与分离胶的区别在于，堆积胶的pH值为6.8，而分离胶的pH值为8.8。

引用

1.“聚丙烯酰胺凝胶电泳”。聚丙烯酰胺凝胶电泳（理论）：分子生物学虚拟实验室II：生物技术和生物医学工程：Amrita Vishwa Vidyapeetham虚拟实验室。可在此处获取2.“SDS-PAGE如何工作。”Bitesize Bio，2018年2月16日。这里提供3。“SDS-PAGE堆叠凝胶-BICH 608（Polymanis Pettigrew）。”谷歌网站。此处提供
2.“SDS-PAGE工作原理”，《Bitesize Bio》，2018年2月16日。
3.“SDS-PAGE堆叠凝胶-BICH 608（Polymanis Pettigrew）。”谷歌网站。