电泳(sds page)和免疫印迹(western blot)的区别

蛋白质印迹法是一种从蛋白质样本中检测出特定蛋白质的技术。这项技术是通过几个关键步骤来完成的：凝胶电泳，印迹和杂交。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-Page）是一种根据蛋白质大小（分子量）进行分离的凝胶电泳技术。westernblot是一种特殊的印迹膜，用于在SDS-Page中传递相同模式的蛋白质。SDS-Page和western-blot的主要区别在于SDS-Page可以分离混合物中的蛋白质，而western-blot则可以检测和定量混合物中的特定蛋白质。这两种方法在蛋白质分析研究中都很有用。

内容1。概述和主要区别2。什么是SDS第3页。什么是Western Blot4。并列比较——SDS-Page与Western Blot5。摘要

什么是电泳(sds page)？

SDS-Page是一种用于蛋白质分离的凝胶电泳技术。它广泛应用于生物化学、遗传学、法医学和分子生物学。一旦从样本中提取出蛋白质，它们就会在SDS和聚丙烯酰胺组成的凝胶上运行。SDS是一种阴离子洗涤剂，用于线性化蛋白质（变性蛋白质），并赋予线性化蛋白质与分子量成正比的负电荷。聚丙烯酰胺成为凝胶的固体载体。带负电的变性蛋白质通过凝胶向仪器的正端迁移。根据蛋白质的大小，蛋白质之间的迁移速度不同，会发生分离。因此，SDS-page有助于根据蛋白质的大小分离单个蛋白质。

制备用于蛋白质分级的聚丙烯酰胺凝胶是SDS-Page的关键步骤。聚丙烯酰胺的正确浓度和交联剂的种类对凝胶的物理性质有很大的影响，这使得不同蛋白质的实际分离成为可能。凝胶的孔径应适当控制，以便有效分离。然而，SDS-Page被认为是一种高分辨率的蛋白质分离技术。

SDS-Page技术在蛋白质分析中有很大的局限性。由于SDS在分离前使蛋白质变性，它不允许检测酶活性、蛋白质结合相互作用、蛋白质辅因子等。

图01:SDS-Page

什么是免疫印迹(western blot)？

Western印迹技术能够从蛋白质混合物中检测出特定的蛋白质，并测量蛋白质的数量和分子量。蛋白质印迹是在蛋白质印迹过程中用来获得蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的镜像图像的膜。用于western印迹的膜主要由硝化纤维素或聚偏二氟乙烯（PVDF）组成。带转移蛋白的膜可以用来鉴定所需的蛋白质。通过杂交检测所需的蛋白质需要高质量的抗体。抗体与它的特**抗原结合，显示出所需抗原的存在，这是一种蛋白质。

蛋白质从SDS聚丙烯酰胺凝胶转移到western印迹是通过电印迹来完成的。这是一种快速有效的方法，使蛋白质从凝胶中电泳出来并传递到硝酸纤维素膜上（western blot）。

图02：免疫印迹

电泳(sds page)和免疫印迹(western blot)的区别

总结 - 电泳(sds page) vs. 免疫印迹(western blot)

SDS-page和westernblot是蛋白质分析的两种方法。SDS-Page可根据蛋白质分子量在凝胶上轻松分离蛋白质。westernblot有助于通过与特**抗体杂交来确认特定蛋白的存在和数量。这是SDS-Page和westernblot的区别。

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