硝化纤维素膜与PVDF膜的主要区别在于硝化纤维素膜具有较高的蛋白质结合能力,而PVDF膜具有较低的蛋白质结合能力。此外,蛋白质分子通过疏水相互作用与硝化纤维素膜结合,而蛋白质分子通过疏水相互作用和偶极相互作用与PVDF膜结合。此外,硝化纤维素膜比PVDF膜具有更高的灵敏度。
硝酸纤维素膜和聚偏氟乙烯膜是westernblot中用于凝胶电泳转移分离蛋白的两种膜。一般来说,膜的主要功能是作为一个物理支架,保存蛋白质片段。
1.什么是硝化纤维素膜-定义、特征、重要性2。什么是聚偏氟乙烯膜-定义,特点,重要性3。硝化纤维素和聚偏氟乙烯膜之间有什么相似之处——共同特征概述4。硝化纤维膜和聚偏氟乙烯膜的区别是什么?主要区别的比较
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硝化纤维素膜是最早用于western印迹的膜之一。它仍然是这种技术最流行的选择,因为它是瞬时的,几乎是不可逆的。此外,硝化纤维素膜很容易水合。但是,它不适用于剥离、重涂或苛刻的化学处理。支撑硝化纤维素膜是一种固定的选择,因为它们的惰性支撑结构增加了强度和弹性。
Figure 1: Electrophoretic Transfer
此外,在westernblotting中,凝胶上的蛋白质片段通过一种称为电泳转移的过程转移到硝化纤维素膜上。这个过程背后的原理是带负电荷的蛋白质向阳极迁移。
PVDF膜是用于westernblotting的另一种膜。与硝化纤维素膜相比,它具有更高的蛋白质结合能力。因此,这也增加了检测的灵敏度。然而,由于检测到低表达的蛋白质,灵敏度的提高导致了更高的背景。
Figure 2: Nitrocellulose Membrane
此外,关于硝化纤维素膜,PVDF膜在与转移缓冲液一起使用之前不必用甲醇预湿。这可防止低SDS/高甲醇溶液沉淀高分子量蛋白质。同时,SDS的加入提高了PVDF膜的印迹效率。
硝化纤维素膜是一种用于蛋白质在westernblot中固定化的粘性膜。同时,PVDF膜是westernblot中用于蛋白质转移的另一种具有高结合能力的膜。
硝化纤维膜易碎,而聚偏氟乙烯膜物理上耐用。
虽然硝化纤维素膜不耐化学腐蚀,但聚偏氟乙烯膜耐化学腐蚀。
硝化纤维素膜必须用甲醇预湿,而聚偏氟乙烯膜不需要预湿。
此外,硝化纤维素膜具有相对较低的蛋白质结合能力(80-100μ而PVDF膜具有较高的蛋白质结合能力(170-200)μg/cm2)。
蛋白质通过疏水相互作用与硝化纤维膜结合,而它们通过疏水和偶极相互作用与聚偏氟乙烯膜结合。
硝化纤维素膜不需要在转移缓冲液中加入SDS,这增强了低分子量蛋白质的结合,有助于防止蛋白质通过膜的过度转移,而SDS提高了蛋白质在PVDF膜上的印迹效率。
硝酸纤维素膜用于低分子量蛋白质,聚偏氟乙烯膜用于高分子量蛋白质。
此外,硝化纤维素膜具有相对较低的灵敏度,而PVDF膜由于其较高的结合能力而具有较高的灵敏度。
硝化纤维素膜由于其灵敏度较低而产生较低的背景,而聚偏氟乙烯膜由于其在检测低表达蛋白质方面的更高灵敏度而产生较高的背景。
除此之外,硝化纤维素膜很难剥离和再生,而PVDF膜由于疏水性较高,很容易剥离和再生。
硝化纤维素膜用于核酸分析;300 bp),氨基酸分析和点/槽杂交,而PVDF膜用于蛋白质测序、氨基酸分析和固相分析系统。
硝化纤维素膜是westernblot中重要的膜类型。然而,它具有较低的蛋白质结合能力和敏感性。它还会产生较低的背景。此外,它主要用于高分子量蛋白质的分离。PVDF膜是westernblot分离高分子量蛋白质的另一种膜。此外,该膜具有较高的蛋白质结合能力和敏感性。然而,它产生了更高的背景。因此,硝化纤维素膜和聚偏氟乙烯膜的主要区别在于它们的蛋白质结合能力和敏感性。
1.蛋白质人。”聚偏氟乙烯或硝化纤维素-哪种膜最好?“G-BIOSCIENCES,2014年11月12日,可在此处获得。
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