如何毛细管电泳工作(capillary electrophoresis work)

毛细管电泳(CE)是一种利用电场分离混合物成分的分析分离方法。基本上,这是毛细管电泳,一个狭窄的管。因此,混合物的组分根据其电泳迁移率进行分离。决定特定分子电泳迁移率的三个因素是分子的电荷、分离介质的粘度和分子的半径。只有离子受电场的影响,而中性粒子不受电场的影响。分子通过毛细管的速率取决于电场的强度。...

毛细管电泳(CE)是一种利用电场分离混合物成分的分析分离方法。基本上,这是毛细管电泳,一个狭窄的管。因此,混合物的组分根据其电泳迁移率进行分离。决定特定分子电泳迁移率的三个因素是分子的电荷、分离介质的粘度和分子的半径。只有离子受电场的影响,而中性粒子不受电场的影响。分子通过毛细管的速率取决于电场的强度。

覆盖的关键领域

1.什么是毛细管电泳-定义,仪器,方法2.毛细管电泳如何工作-毛细管电泳理论

关键词:毛细管电泳,毛细管电泳分离方法,毛细管,电荷,电渗流电泳迁移率

如何毛细管电泳工作(capillary electrophoresis work)

什么是毛细管电泳(capillary electrophoresis)?

毛细管电泳是指一种分析分离方法,通过这种方法,混合物中的成分根据其电泳流动性进行分离。在早期的实验中,使用了一个充满凝胶或溶液的玻璃U形管。60年代后开始使用毛细管。

仪器

毛细管由熔融石英组成,内径为20-100µm。高压电场被提供给毛细管的两端。电极通过电解质溶液或水缓冲液连接到毛细管的端部。毛细管中充满一定pH值的导电液体。除了探测器和其他输出装置外,还使用一些仪器来控制系统的温度,确保结果的可再现性。通过注射将样品引入毛细管。毛细管电泳系统的仪器如图1所示。

How Does Capillary Electrophoresis Work_Figure 1

Figure 1: Capillary Electrophoresis – Instrumentation

毛细管电泳分离方法

毛细管电泳分离方法有六种。

  1. 毛细管区带电泳(CZE)——导电液采用自由溶液。
  2. 毛细管凝胶电泳(CGE)——导电液采用凝胶。
  3. 胶束电动毛细管色谱(MEKC)——通过胶束与溶剂/导电流体之间的分配分离混合物的组分。
  4. 毛细管电色谱(CEC)——除了导电流体外,使用填充柱。流动液体随待分离的混合物一起通过柱。
  5. 毛细管等电聚焦(CIEF)——主要用于分离两性离子组分,如肽和蛋白质,这些成分既包含正负电荷。利用pH梯度的导电流体分离蛋白质溶液。每一种蛋白质都在pH梯度内以等电点迁移到该区域。在等电点,蛋白质的净电荷变为零。
  6. 毛细管等渗树脂(CITP)——它是一个不连续的系统。每个组件在连续区域中迁移,通过测量迁移长度来获得组件的数量。

毛细管电泳是如何工作的

一般来说,带电粒子开始在电场中运动。电荷、粘度和分子半径是决定分子在电场中电泳迁移率的三个因素。

  1. 电荷-阳离子(带正电荷的分子)向阴极(负电极)移动,而阴离子(带负电荷的分子)向阳极(正电极)移动。
  2. 粘度–介质的粘度与分子的运动相反,对于特定的分离介质,粘度是恒定的。
  3. 离子/分子半径-电泳迁移率随分子半径的增大而减小。

因此,如果两个大小相同的分子进行电泳,电荷越大的分子移动越快。随着电场强度的增大,带电物种的迁移率也随之增加。毛细管电泳的机理如图2所示。

How Does Capillary Electrophoresis Work

Figure 2: Capillary Electrophoresis

电渗流

电渗流产生毛细管电泳流动相。在大多数情况下,毛细管材料是二氧化硅。当pH值大于3的溶液通过毛细管时,二氧化硅被水解,产生带负电荷的二氧化硅离子。然后,毛细管壁承受负电荷层。溶液中的阳离子被这些负电荷吸引,在负电荷上形成一层双层阳离子。内阳离子层是稳定的,而外阳离子层作为带电分子的体流向阴极移动。在毛细管电泳过程中,阳离子的大量流动发生在毛细管壁附近。毛细管壁附近的电渗流如图3所示。

How Does Capillary Electrophoresis Work

Figure 3: Electroo**otic Flow

毛细管壁的小直径有助于最大限度地发挥EOF的作用,有助于它在毛细管电泳带电粒子的运动中发挥重要作用。

结论

毛细管电泳是一种分析分离方法,其中带电物种分离的基础上,他们的电泳流动性。一般来说,分子的大小和电荷是分离的因素。

引用

1.“毛细管电泳。” 化学剧本,剧本,2017年11月28日,可在这里获得。

  • 发表于 2021-06-30 13:45
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  • 分类:科学

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