蔗糖梯度和蔗糖缓冲超速离心的关键区别在于,在蔗糖梯度超速离心中,使用连续的蔗糖梯度,而在蔗糖缓冲超速离心中,使用不连续的蔗糖梯度。
蔗糖梯度法和蔗糖缓冲超速离心法是分离特定类型大分子的两种类似的技术。在这两种技术中,使用蔗糖密度梯度。但在蔗糖梯度超速离心中,使用连续的密度梯度,而在蔗糖缓冲超速离心中,使用不连续的密度梯度。
目录
1. 概述和主要区别
2. 什么是蔗糖梯度超速离心
3. 什么是蔗糖缓冲超速离心
4. 蔗糖梯度法与蔗糖缓冲超速离心法的相似性
5. 并列比较-蔗糖梯度与蔗糖缓冲超速离心表格式
6. 摘要
什么是蔗糖梯度离心(sucrose gradient ultracentrifugation)?
蔗糖梯度超速离心技术是一种可以分离DNA、RNA和蛋白质等大分子的技术。这项技术有几个步骤。它们是蔗糖梯度制备、离心、分离和洗脱。梯度是这一步的关键技术。在这项技术中,样品含有不同大小的大分子被分层在蔗糖梯度柱的表面。离心时,不同大小的大分子以不同的速率通过蔗糖梯度柱沉淀。沉降取决于几个因素,包括离心力、大分子的大小形状和密度、梯度的密度和粘度。离心结束时,大分子在空间上被密度分离。较大的大分子(高密度大分子)向底部沉积。较轻的(低密度的大分子)仍处于梯度的顶部。因此,分子以不同的带分开。然后将这些带分开,并从蔗糖中分离出特定的大分子。
在应用方面,这种方法被广泛应用于DNA分子的分离。蔗糖梯度超速离心法常用于表征蛋白质复合物的大小和组成。此外,该技术还可用于mRNA的部分纯化。
什么是蔗糖缓冲超速离心(sucrose cushion ultracentrifugation)?
蔗糖缓冲超速离心是另一种能够分离大分子的技术。与蔗糖密度梯度超速离心不同,蔗糖缓冲超速离心使用不连续的密度梯度。蔗糖浓度从上到下依次递增。在这项技术中,分离是通过将澄清的提取物放在离心管(所谓的蔗糖缓冲)中的小体积蔗糖溶液上来实现的。这样可以在高速离心中更好地分离。当分子在蔗糖缓冲垫之间分离成一条带时,可以收集并纯化白色带。此外,利用蔗糖缓冲法可以进一步去除杂质。蔗糖缓冲法允许60-70%的试管充满样品。因此,蔗糖缓冲法能够处理更大体积的样品。
蔗糖梯度离心(sucrose gradient)和蔗糖缓冲超速离心(sucrose cushion ultracentrifugation)的共同点
- 蔗糖梯度法和蔗糖缓冲超速离心法是分离大分子混合物的两种技术。
- 在这两种方法中,使用蔗糖梯度。
- 离心是两种方法中的一个步骤。
- 在每种方法中,分子沉淀成一条带或一条带。
蔗糖梯度离心(sucrose gradient)和蔗糖缓冲超速离心(sucrose cushion ultracentrifugation)的区别
蔗糖梯度超速离心是一种在离心管中使用连续蔗糖梯度的技术,而蔗糖缓冲超速离心是一种使用不连续蔗糖梯度的技术。因此,这是蔗糖梯度法和蔗糖缓冲超速离心法的关键区别。
此外,蔗糖缓冲超速离心允许处理较大体积的样品,而蔗糖梯度超速离心允许处理相对较小体积的样品。
下图列出了蔗糖梯度法和蔗糖缓冲超速离心法之间的更多差异。
总结 - 蔗糖梯度离心(sucrose gradient) vs. 蔗糖缓冲超速离心(sucrose cushion ultracentrifugation)
蔗糖梯度超速离心分离大分子使用连续的蔗糖梯度。相反,蔗糖缓冲超速离心法使用不连续的蔗糖梯度来分离混合物**定类型的颗粒。因此,这是蔗糖梯度法和蔗糖缓冲超速离心法的关键区别。蔗糖缓冲法可以收集形态完整的颗粒,因为它不会引起机械应力,不像蔗糖梯度超速离心,后者将分子压碎到试管底部。此外,蔗糖缓冲超速离心比蔗糖梯度超速离心能够处理更大体积的样品。
引用
1Dijkstra,Jeanne,和Cees P.de Jager。“密度梯度离心法”,斯普林克,斯普林格,柏林,海德堡,1998年1月1日,可在这里查阅。