如何sds变性蛋白(sds denature proteins)

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是一种用于生物技术中蛋白质分子量分离的电泳技术。一般来说,蛋白质是两性分子,在同一分子中既有正电荷又有负电荷。因此,给蛋白质分子一个均匀的负电荷,以便在电泳过程中使其向单一方向移动。负电荷由十二烷基硫酸钠(SDS)产生,SDS是一种阴离子洗涤剂。天然蛋白质被SDS变性,因为SDS干扰了蛋白质的非共价力。...

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是一种用于生物技术中蛋白质分子量分离的电泳技术。一般来说,蛋白质是两性分子,在同一分子中既有正电荷又有负电荷。因此,给蛋白质分子一个均匀的负电荷,以便在电泳过程中使其向单一方向移动。负电荷由十二烷基硫酸钠(SDS)产生,SDS是一种阴离子洗涤剂。天然蛋白质被SDS变性,因为SDS干扰了蛋白质的非共价力。

覆盖的关键领域

1.什么是SDS–定义、结构2.SDS如何变性蛋白质–蛋白质和SDS之间的相互作用3.SDS–SDS在PAGE中的作用是什么

关键词:荷质比、分子量、净负电荷、蛋白质、十二烷基硫酸钠(SDS)、SDS-PAGE

如何sds变性蛋白(sds denature proteins)

什么是十二烷基硫酸钠(sds)?

十二烷基硫酸钠是指一种阴离子洗涤剂,由亲水性的头基团和疏水性尾组成。因此,当溶解时,其分子在较宽的pH范围内形成净负电荷。SDS的结构如图1所示。

How Does SDS Denature Proteins_Figure 1

Figure 1: SDS

sds如何使蛋白质变性

由于十二烷基硫酸钠是一种洗涤剂,蛋白质的三级结构被十二烷基硫酸钠破坏,使折叠的蛋白质变成线性分子。此外,SDS以均匀的方式与线性蛋白结合。约1.4克十二烷基硫酸钠与1克蛋白质结合。因此,SDS以净负电荷均匀地包裹蛋白质。这种负电荷掩盖了蛋白质中各种R-基上的固有电荷。此外,蛋白质的电荷与分子量成正比。SDS线性化的蛋白质分子宽度为18埃,长度与分子量成正比。蛋白质和十二烷基硫酸钠之间的相互作用如图2所示。

How Does SDS Denature Proteins

Figure 2: SDS and Protein Interaction

什么是sds的作用(the role of sds)?

特定蛋白质中氨基酸的R-基团可能带正电荷或负电荷,使蛋白质成为两性分子。因此,在自然状态下,具有相同分子量的不同蛋白质在凝胶上以不同的速度迁移。这使得分离聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质变得困难。向蛋白质中加入十二烷基硫酸钠使蛋白质变性并以均匀分布的净负电荷覆盖它们。这允许蛋白质在电泳过程中向正极迁移。换句话说,SDS使蛋白质分子线性化并掩盖R-基团上的各种电荷。总之,SDS包被蛋白的荷质比是相同的;因此,不会有基于天然蛋白质电荷的差异迁移。红细胞膜蛋白的SDS-PAGE如图3所示。

How Does SDS Denature Proteins_Figure 3

Figure 3: SDS-PAGE

除SDS-PAGE外,SDS还被用作核酸提取的洗涤剂,用于破坏细胞膜和核酸:蛋白质复合物的解离。

结论

SDS是一种阴离子洗涤剂,在各种生物技术技术中用作洗涤剂。它使蛋白质的三级结构变性,产生线性蛋白质分子。此外,它以均匀的方式与变性蛋白质结合,为所有类型的蛋白质提供均匀的电荷质量比。SDS通过掩蔽蛋白质氨基酸R-基团上的电荷,使蛋白质分子带净负电荷。因此,SDS允许基于其在PAGE上的分子量分离蛋白质,因为电荷与SDS变性蛋白质的分子量成比例。

引用

1.“SDS-PAGE的工作原理。” Bitesize Bio,2018年2月16日,可在此处获取。

  • 发表于 2021-06-30 13:04
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  • 分类:科学

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